[题目]疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程.已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒.该病毒表面的A蛋白为主要抗原.疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示.请回答下列问题:(1)③构建A基因重组载体时.启动子和终止子是重新构建的.它们应该能被受体细胞的所识别.以便于其催化转录过程.(2)下图为A基因的结构示意图.已知Ⅱ区的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程，已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示，请回答下列问题：

(1)③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的________所识别，以便于其催化转录过程。

(2)下图为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域转录产生的能指导蛋白质合成的mRNA中A和U总数是________个。

(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的________数目。过程⑥的实质为________。

(4)在将X进行扩大培养前，至少需要经过________次筛选，其中包括_______________和__________,扩大培养的原理是________。

(5)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的________与分离出的病毒进行特异性检测。

【答案】 RNA聚合酶 400 浆细胞基因的选择性表达 2 筛选出杂交瘤细胞筛选出产生特定（抗A蛋白）抗体的杂交瘤细胞细胞增殖(有丝分裂) A蛋白抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】试题分析：本题考查基因工程、基因的表达、细胞工程、免疫，考查对基因表达载体组成、转录过程、单克隆抗体制备流程与应用、二次免疫及免疫应用的理解。解答此题，可根据基因中碱基比例关系和转录过程中的碱基互补配对原则进行第（2）小题的计算，根据浆细胞和小鼠骨髓瘤细胞的融合结果分析两次筛选的目的。

(1)A基因重组载体中，启动子和终止子是RNA聚合酶的识别部位，以开始和结束转录过程。

(2) Ⅱ区的碱基数为2000个，减去阴影部分碱基数800个，得到空白区的碱基数为1200个，该区段能指导蛋白质合成，其中C和G占400个，则A和T共800个，每条链中A和T有400个，转录以基因的一条单链为模板，根据碱基互补配对原则，转录得到的RNA中A和U应为400个。

(3)给小鼠皮下注射A蛋白时，重复注射几次的目的是让小鼠产生更快、更强的二次免疫反应，使记忆细胞增殖、分化，产生较多的浆细胞。过程⑥为B细胞的分化过程，其实质是基因的选择性表达。

(4)浆细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后，由于存在多种融合细胞，首先要用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，然后经克隆化培养，用A蛋白作为抗原检测，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞。扩大培养过程中杂交瘤细胞通不断的有丝分裂，增加杂交瘤细胞数目。

(5)对健康人进行该传染病免疫预防时，图中基因工程生产的病毒表面的A蛋白可作为疫苗，刺激机体产生记忆细胞和抗体，但不会使人致病。对该传染病疑似患者确诊时，可利用单克隆抗体特异性强、灵敏度高的特点，用图中的抗A蛋白的单克隆抗体与分离出的病毒进行特异性检测。

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据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是______________________。

（2）过程②后，在显微镜下观察触合的活细胞中有供体的___________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。进一步对杂种植株进行___________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

（3）为研究甘蓝的A基因与抗性是否有关，科研人员提取野生甘蓝的DNA，将氨苄青霉素的抗性基因（N基因）插入A基因中，替换A基因的中间片段，如图。

为达到上述目的，用限制酶处理后，在A1片段与N基因、N基因与A3片段间要有___________。要使改造后的A基因能表达出N基因所编码的蛋白质，插入的N基因前端应包含_____________________。PCR扩增改造后的A基因，转入野生甘蓝细胞中，并用加入___________的培养基筛选，获得的甘蓝细胞，其愈伤组织培育后发现也非常容易感染软腐病，表明A基因是_________________________________。

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