Question

（8分）菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：

（注：卡那霉素抗性基因（Kan^R为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）

(l)质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是    ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。

(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是    ，连接它们所需要的基本工具是    。

(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用    处理；使其处于感受态。

(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及    的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。

(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物共用了31个，则目的基因最多扩增了    次。

(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答：

①对照组应饲喂等量的    。

②据表分析，    差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。

 

Answer 1

【答案】

(1)小型环状DNA

(2)GATC (CTAG)    DNA连接酶    (3)Ca2+（或“CaCl2"）

(4)卡那霉素    (5)5

(6)①非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物    ②实验组与对照组死亡率

【解析】

试题分析：（1）质粒是一类存在于细菌和真菌细胞中独立于DNA而自主复制的共价、闭合、环状DNA分子。（2）当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，即5’突出。这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。因此称这些片段具有粘性，叫做粘性末端。限制酶M和N切割产生的黏性末端是GATC (CTAG) ，粘性末端连接的话是DNA连接酶起作用。（3）通常用钙离子处理细菌，使之处于感受态 。（4）基因表达载体的构建中，需要标记基因，根据题意可知该标记基因为卡那霉素，因此需要在加入卡那霉素的培养基中选择出成功转入目的基因的菊花。（5）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物共用了31个，则目的基因最多扩增了5次。（6）实验设计遵循对照原则，因此对照组应该加入非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物；根据实验组比对照组的死亡率高，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。

考点：本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。