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【题目】研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就“如何从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题:

(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和_____________ 酶。

(2)若获得纯净的菌株,常采用平板划线法进行接种,此过程所用的接种工具是__________,对该接种工具采用_________灭菌的方法。

(3)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,但并不与____________发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在倒平板时就加入刚果红。______(填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂。

(4)如果观察到产生________的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行______________________的实验。

【答案】葡萄糖苷 接种环 灼烧 纤维二糖 葡萄糖 第一种 透明圈 发酵产纤维素酶

【解析】

土壤中存在着大量纤维素分解酶,包括真菌、细菌和放线菌等,它们可以产生纤维素酶;

纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用;

在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌。

1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。

2)若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是接种环,操作时采用灼烧灭菌的方法。

3)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。第二种方法:产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈,故两种方法各有缺点。

4)刚果红与纤维素反应呈红色,纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色,在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

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