Question

8．2013年初，我国部分地区陷入严重的雾霾和污染天气中，北京的空气污染指数PM2.5曾接近1000．据统计，北京近十年来肺癌患者增加了60%，引起肺癌的因素有多种，如大气污染、吸烟、免疫力降低等．分析以下材料，回答相关问题：
研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．
该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答．

（1）进行过程①时，需用同种限制性核酸内切酶酶切割质粒、含let-7基因的DNA片段．
（2）进行过程②时，需用胰蛋白酶酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．
（3）let-7基因需采用PCR技术扩增，该过程需要用到耐高温的DNA聚合酶．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：分图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示用胰蛋白酶处理组织细胞，使之成为单个细胞，再加细胞悬液进行细胞培养的过程．
图2表示let-7基因影响癌基因RAS的表达的原理，let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

解答 解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用同种限制性核酸内切酶对载体和含let-7基因的DNA片段进行切割，以便于目的基因的插入．
（2）过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养．
（3）let-7基因需采用PCR技术扩增，该过程需要用到耐高温的DNA聚合酶．
故答案为：
（1）同种限制性核酸内切酶   质粒   含let-7基因的DNA片段
（2）胰蛋白酶
（3）PCR  耐高温的DNA聚合

点评 本题考查基因工程的原理和技术、遗传信息的转录和翻译的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和操作步骤．要求能分析图1，准确判断各过程的名称；掌握遗传信息的转录和表达过程，并能利用图2信息答题．