Question

【题目】近年来研究发现川楝素具有良好的抑制癌细胞增殖的能力。某研究人员为验证川楝素对人胃癌 MGC-803 细胞的生长具有明显的抑制作用，且该作用随着川楝素浓度的增加和作用时间的延长愈发明显，从而为川楝素在胃癌治疗领域的开发利用提供理论依据。请根据以下所给材料及用具完善实验思路。

材料用具：人胃癌 MGC-803 细胞悬液，完全培养液，以完全培养液配置的浓度分别为30、50、70nmol/L的川楝素溶液，5%CO2培养箱，12孔细胞培养板，酶标仪（检测各组的平均活细胞数）等。

要求与说明：细胞生长抑制率=（1-实验组的平均活细胞数/对照组的平均活细胞数）×100%，实验条件适宜

（1）实验思路：

①将12孔细胞培养板平均分成________组，分别加入________________________和________________________，于_________________中培养至细胞的对数生长期。

②给各组细胞培养板分别加入_____________________。

③将各组细胞培养板于适宜且相同环境下培养，24、48、72h分别用酶标仪检测各组的平均活细胞数，并计算各组细胞的生长抑制率。

④对所得实验数据进行统计、分析和处理。

（2）实验结果：__________（请以川楝素溶液浓度为横坐标，绘制不同时间下的抑制率曲线）。

（3）实验结论与

①实验结果证实川楝素对人胃癌 MGC-803 细胞的生长具有明显的抑制作用，且该作用呈一定________依赖性。

②经研究发现川楝素能够将人胃癌 MGC-803 细胞阻滞在G1期进而抑制细胞增殖，其原理可能是_________________。

Answer 1

【答案】4 人胃癌MGC-803细胞悬液 完全培养液 5%CO2培养箱 浓度分别为30、50、70nmol/L的川楝素溶液 时间和剂量 抑制细胞周期内某些特定基因的表达、促进某些特定蛋白质的分解

【解析】

该实验是为验证川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长具有明显的抑制作用，采用了以完全培养液配置的浓度分别为30、50、70nmol/L的川楝素溶液3个梯度来探究川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长的抑制作用。实验中还需要对照组进行对比观察，故12孔细胞培养板需分为4组，加入人胃癌MGC-803细胞悬液、完全培养液于5%CO2培养箱中培养至细胞的对数生长期后，用3个梯度的川楝素溶液进行处理，在适宜且相同环境下培养，24、48、72h分别用酶标仪检测各组的平均活细胞数，并计算各组细胞的生长抑制率。由于川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长的抑制作用随着川楝素浓度的增加和作用时间的延长愈发明显，故能推断出该3个梯度处理的细胞生长抑制率为24h＜48h＜72h，且川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长的抑制作用与作用时间和浓度有关。

（1）①实验设计中都需要设计对照组，这样才能消除无关变量对实验结果的影响，故将12孔细胞培养板平均分成4组，本实验是为验证川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长的抑制作用，分别需要将人胃癌MGC-803细胞培养至适宜实验的前提下，才能对人胃癌MGC-803细胞进行川楝素处理，故需要先加入人胃癌MGC-803细胞悬液和完全培养液，于5%CO2培养箱中培养至细胞的对数生长期。
②在人胃癌MGC-803细胞达到进行实验条件后，给各组细胞培养板分别加入30、50、70nmol/L的川楝素溶液，空白组不添加。
（2）结合题干信息给出的实验结果，曲线图为：

（3）①实验结果证实川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长具有明显的抑制作用，且川楝素对人胃癌MGC-803细胞的生长的抑制作用与作用时间和浓度有关，故该作用呈一定时间和剂量依赖性。
②经研究发现川楝素能够将人胃癌MGC-803细胞阻滞在G1期进而抑制细胞增殖，分裂间期是为分裂期进行物质准备的，完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成，故其原理可能是抑制细胞周期内某些特定基因的表达、促进某些特定蛋白质的分解。