【题目】引起人类产生埃博拉出血热的埃博拉病毒（EBOV），是一种单链RNA病毒，某研究团队利用其跨膜表面糖蛋白（GP），以重组腺病毒为载体研发了埃博拉疫苗。腺病毒是一种DNA病毒，腺病毒载体包括骨架质粒（携带腺病毒的主要功能基因）和穿梭质粒（能转移外源基因到骨架质粒上）。下图为重组埃博拉疫苗制作的部分流程示意图，已知四种限制性核酸内切酶KpnI、BamHI、NheI、BgIII的识别序列和酶切位点分别为：
。请回答下列问题：
（1）为了判断是否感染EBOV，利用探针对疑似患者进行核酸检测，其检测方法采用了______技术。为了提高检测的准确性，需从EBOV核酸中选取具有______的序列作为探针设计的模板。
（2）从EBOV基因组中分离出的GP基因不能直接与穿梭质粒重组，其原因是______；而过程①获得的GP基因片段因两端缺乏______也不能直接与穿梭质粒重组。研究人员在过程①获得的GP基因片段下游添加了含“-AGATCT-”的序列，则需在其上游添加包含有______序列的片段，以便与穿梭质粒重组，且能避免GP基因反向连接。
（3）实际操作中需利用限制酶将环状的重组穿梭质粒切成两个核苷酸片段，则切割前后含有的游离磷酸基团数目变化为______。将含GP基因的核苷酸片段与骨架质粒通过过程④完成重组，再在含______的平板上培养，筛选出含重组骨架质粒的阳性菌。
（4）过程⑤中，利用脂质体将重组骨架质粒导入到人的胚胎肾细胞HEK293中，其运用的原理是______，再将成功导入的细胞HK293培养一段时间，获得大量重组腺病毒，为疫苗的进一步研究奠定基础。
【答案】分子杂交 特异性 GP基因是单链RNA结构 相应的限制酶酶切位点（或相应的限制酶识别序列） -GGTACC- 0→4 卡那霉素 膜的流动性
【解析】
基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
（1）为了判断是否感染EBOV，利用探针（能与病毒的互补配对的序列）对疑似患者进行核酸检测，其检测方法采用了分子杂交技术（碱基互补配对）。为了提高检测的准确性，需从EBOV核酸中选取具有特异性的序列作为探针设计的模板。
（2）EBOV是RNA病毒，从EBOV基因组中分离出的GP基因是单链RNA结构，不能直接与穿梭质粒重组，且过程①获得的GP基因片段因两端缺乏相应的限制酶酶切位点（或相应的限制酶识别序列）也不能直接与穿梭质粒重组。质粒与目的基因相连，需要有相同的粘性末端，因此需要在目的基因两端添加酶切位点，从图中可知质粒的启动子和终止子之间有三种酶切位点（KpnI、BamHI、BgIII），“-AGATCT-”的序列是BgIII的识别位点，若用BamHI来酶切，会得到相同的粘性末端，因此只能用KpnI来酶切质粒，则需在GP基因上游添加包含有-GGTACC-序列的片段，且能避免GP基因反向连接。
（3）实际操作中需利用限制酶将环状的重组穿梭质粒切成两个核苷酸片段，有两个酶切位点，一个酶切位点会比切割前多出来2个游离的磷酸基团，则切割前后含有的游离磷酸基团数目变化为0→4。将含GP基因的核苷酸片段与骨架质粒通过过程④完成重组，重组质粒含卡那霉素抗性基因，因此需在含卡那霉素的平板上培养，筛选出含重组骨架质粒的阳性菌。
（4）脂质体(空心)是由卵磷脂和神经酰胺等制得的双分子层结构，过程⑤中，利用脂质体将重组骨架质粒导入到人的胚胎肾细胞HEK293中，其运用的原理是膜的流动性（相似相溶）。
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【题目】如图是tRNA的结构示意图，图中a端是3′端，d端是5′端，反密码子的读取方向为“3′端→5′端”。下列叙述正确的是（ ）
A.tRNA是由三个核糖核苷酸连接成的单链分子
B.tRNA为双链分子，图中b处上下链之间的碱基通过氢键互补配对
C.c处表示密码子，可以与mRNA碱基互补配对
D.该tRNA在翻译过程中可搬运密码子为ACC的氨基酸
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【题目】已知在同一碳原子上连有两个羟基的化合物是极不稳定的，它会自动失水生成含醛基的化合物。在无其他氧化剂存在的条件下，以甲苯和氯气为主要原料按下列过程制取苯甲醛（C6H5CHO）：
（1）条件2中的试剂为___。
（2）写出苯甲醛与新制Cu(OH)2悬浊液反应的化学方程式：___。
（3）苯甲醛在强碱性条件下可发生自身氧化还原反应，即部分氧化成羧酸盐A，部分还原成醇B。写出A经酸化后的产物与B发生酯化反应生成的一种新的化合物C的结构简式：___。
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【题目】G常用于有机合成和药物制造，一种合成G的路线如图，请回答相关问题。
（1）根据系统命名法，A的名称是___。
（2）A→B反应类型为___，D→E反应类型为___。
（3）D分子中官能团名称为___。
（4）C→D反应的化学反应方程式为___。
（5）E→G反应的化学反应方程式为___。
（6）满足下列条件的E的同分异构体还有__种，其中核磁共振氢谱中有五组峰，面积比为2∶2∶2∶1：1的同分异构体的结构简式为___。
①与碳酸钠溶液反应有气体产生②1mol该有机物与Na反应产生1mol气体
（7）已知：CH2=CHCH3
CH2=CHCH2Cl
写出以丙烯为原料制备丙三醇的合成路线流程图（无机试剂任用）__。
合成路线流程图示例如下：
原料
…产物
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【题目】如图为“细胞直接与内环境进行物质交换”的图解，其中②④⑤为细胞外液。相关叙述中错误的是（ ）
A.②中可发生丙酮酸氧化分解，产生二氧化碳和水
B.若某人长期营养不良，会导致血浆中蛋白质含量降低，进而使图中②液体增加，引起组织水肿
C.⑥所处的内环境为血浆
D.某人皮肤烫伤后出现了水泡，主要是指图中的标号②增多的结果
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【题目】某湿地生态系统中，除分解者外，仅有甲、乙、丙、丁、戊5个种群，调查得知，该生态系统有4个营养级，营养级之间的能量传递效率为10%～20%，且每个种群只处于一个营养级。下表为该生态系统中一年内输入各种群的能量数值，表中能量数值的单位相同，回答下列相关问题：
种群 | 甲 | 乙 | 丙 | 丁 | 戊 |
能量 | 3.56 | 12.8 | 10.30 | 0.48 | 226.50 |
（1）该生态系统中，处于第二营养级的生物是__________________。
（2）生态系统的主要功能包括物质循环、能量流动和__________________等功能。碳循环对生物和生态系统具有重要意义，碳在无机环境和生物群落之间主要以_________________的形式进行循环。
（3）该生态系统通过多年演替，生物多样性增加，其中芦苇、菖蒲、碱茅等植物呈散乱、交错分布状态，从群落的结构角度看，这属于群落的_________结构。这样的分布给该湿地生态系统增添了旅游观光等多方面的资源，体现了生物多样性的__________价值。
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【题目】在恢复静息电位过程中，图所示的钠钾泵会参与对两种离子的转运过程，下列说法错误的是（ ）
A.图中膜电位形成的主要原因是K+从A侧到B侧移动造成的
B.钠钾泵吸K+排Na+的过程属于主动运输
C.血钠不足时，会引起脑组织水肿，产生头痛等症状
D.神经细胞受到刺激产生兴奋，主要是由于Na+从A侧到B侧引起膜电位改变
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【题目】下图为一种新型高效农业生态循环系统，其中包含了农田生产系统、大耳羊养殖系统苗木蔬菜种植系统和特种生态养殖系统，解决了现有农业生产附加值低、农民收入不高，以及禽畜养殖业的发展过程中带来环境污染问题。下列有关叙述错误的是（ ）
A.常温厌氧沼气池和恒压沼气池中的甲烷菌在无氧条件下才可以将有机废物转化成有用的甲烷，无氧呼吸在人和动物的肠道微生物中也能发生
B.设计该农业生态系统时，应运用的生态工程原理有物质循环再生、整体性、系统学和工程学原理等
C.大耳羊养殖场产生的粪渣可作为苗木和果树的有机肥料，既能改善土壤结构、提高土壤肥力，又能被微生物分解，所释放二氧化碳可促进果木的光合作用
D.人类通过建立新型高效农业生态循环系统，调整了能量流动关系提高了生态系统的能量传递效率，使能量尽可能多地流向对人类最有益的部分
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【题目】如图是人体组织细胞的新陈代谢与四大系统(A、B、C、D表示四大系统)关系的模式图，据图回答问题：
(1)A为________系统，A中物质进入B的过程称________。
(2)外界物质经C进入B的方式是________，B中的氧气进入组织细胞被利用的场所是________。
(3)可在B内流动但不能进入D的是________，若最终在D中检测出有葡萄糖则原因可能是一次性吃糖太多或________分泌不足。
(4)经D排出的最终成分除了尿素外，还有多余的________，除该途径外，排出代谢废物的器官还有________、________。
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