Question

8．科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达．过程如图，据图回答：
（1）过程①表示采取反转录法的方法来获取目的基因．
（2）形成图中②含有目的基因的DNA（重组质粒）需要的酶包括：限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（3）基因工程中常用的载体除有质粒外，还有λ噬菌体的衍生物（动植物病毒）．重组质粒包括启动子、目的基因、标记基因及终止子等部分．
（4）图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，一般将受体大肠杆菌用氯化钙处理，使细胞成为感受态细胞，从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有（氨苄）青霉素的培养基上，若细菌能够生长，说明：已导入了重组质粒或普通质粒A，理由：普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质，用到的技术分别是DNA分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示利用基因工程培育抗虫棉过程，其中①表示通过人工合成法获取目的基因；②表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；③表示将目的基因导入受体细胞．

解答 解：（1）图中①表示采用反转录法（人工合成法）获取目的基因．
（2）②是基因表达载体，构建基因表达载体时，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（3）基因工程中常用的载体除有质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒．重组质粒包括启动子、目的基因、标记基因及终止子等部分．
（4）将目的基因导入大肠杆菌常用感受态细胞法，即用氯化钙处理，使细胞成为感受态细胞，从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．质粒上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的目的基因破坏掉，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒A，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质，用到的技术分别是DNA分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）反转录法    
（2）限制性核酸内切酶、DNA连接酶
（3）λ噬菌体的衍生物（动植物病毒）  目的基因  标记基因
（4）氯化钙  感受态细胞  （氨苄）青霉素  普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因
（5）DNA分子杂交技术    抗原-抗体杂交技术

点评 本题结合转基因棉花培育过程图，考查基因工程、植物组织培养等知识，要求考生识记基因工程的工程及操作步骤，能根据限制酶识别序列选择合适的限制酶，并能准确判断图中各过程的名称，再结合所学的知识准确答题．