[题目]2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家.绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光.这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况.帮助推断蛋白质的功能.下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图.据图回答:(1)以上培育过程中应用到的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（1）以上培育过程中应用到的生物技术有。（任选两个）

（2）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：（用数字表示）。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入等天然成分。

（4）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能连接起来，理由是：。

【答案】（1）基因工程、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植任选两个

（2）②①③④ （3）血清

（4）------G GATCC-----------

------ CCTAG 或 G-------

两个不同的限制酶切割产生的黏性末端互补（答“相同且互补”也给分）

【解析】（1）以上培育过程中应用到的生物技术有基因工程、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植（2）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：②①③④

（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入血清等天然成分。

（4）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。那么质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端为

------G GATCC-----------

------ CCTAG 或 G-------

在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能连接起来，理由是两个不同的限制酶切割产生的黏性末端互补

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