Question

科学家将人的胰岛素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人胰岛素．回答下列相关问题：
（1）获取目的基因的主要途径包括直接提取和

 

．
（2）在构建基因表达载体的过程中，目的基因和质粒用同一种

 

 进行切割．
（3）在将基因表达载体导入牛的受精卵的过程中，常采用

 

 法，若将基因表达载体导入大肠杆菌细胞中，则通常采用

 

 溶液处理大肠杆菌，使其成为

 

 细胞．
（4）为了得到较多的卵细胞，可以对受体母牛注射适宜剂量的

 

；利用获能的精子进行体外受精，经过细胞培养至

 

 期进行胚胎移植，最终获得“符合要求的个体”，这个“符合要求的个体”具体是指

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：1、目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子．获得目的基因的方法：①从基因文库中获取  ②利用PCR技术扩增  ③人工合成（化学合成）．
2、将目的基因导入受体细胞，如受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的），具体过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．另外，还可用基因枪法和花粉管通道法；如果受体细胞是动物细胞，常用显微注射技术；如果受体细胞是微生物细胞，用Ca²⁺处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合（在缓冲液中）→一定温度下，感受态细胞吸收DNA分子，完成转化．
3、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

解答： 解：（1）获取目的基因的主要途径包括直接提取从基因文库中获取也可人工合成．
（2）在构建基因表达载体的过程中，目的基因和质粒用同一种限制酶进行切割，使其露出相同的粘性末端，再用DNA连接酶连接成重组基因．
（3）在将基因表达载体导入受体细胞中，如果是动物细胞，常采用显微注射法，如果受体细胞是微生物，常用 CaCl₂处理溶液处理大肠杆菌，使其成为处于感受态．
（4）活体采卵时，先用促性腺激素处理母羊，使其超数排卵．精子必须先要获能，才可以与成熟的卵母细胞受精，具体获能的方法有化学培养法和培养法．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．科学家用基因工程的技术获取乳腺发生器的生物，即能分泌含人胰岛素牛奶的母牛．
故答案为：
（1）人工合成　　
（2）限制酶     
（3）显微注射      CaCl₂      感受态
（4）促性腺激素   桑椹胚或囊胚      能分泌含人胰岛素牛奶的母牛

点评：本题考查了基因工程的原理和技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．