[题目]R-7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA.可与某些mRNA尾端的一段非编码序列(3'-UTR)结合.进而影响基因的表达.为研究R-7是否影响家蚕基因B的表达.科研人员将基因B中对应3'-UTR的DNA片段与荧光素酶基因(该基因的表达不受R-7的影响)重组如甲图所示.将该重组载体导入家蚕胚胎细胞并观察其表达.结果如乙图所示.回答下列问题:(1)要想短时� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】R-7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列（3'-UTR）结合，进而影响基因的表达。为研究R-7是否影响家蚕基因B（调控家蚕眼睛发育）的表达，科研人员将基因B中对应3'-UTR的DNA片段与荧光素酶基因（该基因的表达不受R-7的影响）重组如甲图所示，将该重组载体导入家蚕胚胎细胞并观察其表达，结果如乙图所示。回答下列问题：

（1）要想短时间内获得大量目的基因需用到的技术是_______________________，该技术的原理是________________________。若一个含目的基因的DNA扩增n代，则共需消耗______________对引物。

（2）图甲中对应3'-UTR的DNA片段应插入到位点___________，原因是________________。基因工程的核心步骤是________________，其目的是__________________________。

（3）科研人员从乙图所示的实验组和对照组细胞中提取蛋白质，经处理检测后获得相对荧光值（在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光）。实验组为将重组载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中，对照组1为将含有荧光素酶基因的表达载体（不含对应3′-UTR的DNA片段）导入含R-7的家蚕胚胎细胞中，则对照组2应为_________________。由结果推知R-7通过_______________________进而抑制基因B的表达。

【答案】PCR扩增技术 DNA双链复制 2n-1 2 目的基因应插入到启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因基因表达载体的构建使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用将重组载体导入不含（或去除）R-7的家蚕胚胎细胞中与基因B所转录的mRNA的3'-UTR结合

【解析】

题图图甲是基因表达载体的模式图，包括：启动子、目的基因、荧光素酶基因（标记基因）、终止子。图乙可以看出实验组的相对荧光值较低，而对照组1和对照组2的相对荧光值较高。

（1）短时间内获得大量目的基因需用到的技术是PCR扩增技术，该技术原理是DNA双链复制。若对一个含基因B的DNA扩增n代，共得到2n个DNA，净增DNA为2n-1，因此共需消耗的引物为2n－1个。

（2）依题意可知，R-7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列(3'-UTR)结合，进而影响基因的表达。即3'-UTR位于某些mRNA的尾端，由于mRNA是以DNA分子的一条链为模板转录而来的，因此图甲中对应3'-UTR的DNA片段应插入到位点2，原因是目的基因应插入到启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因。基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

（3）由图乙可知实验组的相对荧光值较低，而对照组1和对照组2的相对荧光值较高。又因为对照组1的处理为将含有荧光素酶基因的表达载体(不含对应3′-UTR的DNA片段)导入含R-7的家蚕胚胎细胞中，说明没有R-7片段的细胞中荧光素酶基因正常表达，相对荧光值较高。实验组为将重组载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中，相对荧光值较低，说明R-7抑制了荧光素酶基因的表达。由此可以推测对照组2的处理应为将重组载体导入不含(或去除)R-7的家蚕胚胎细胞中。R-7通过与基因B所转录的mRNA的3'-UTR结合进而抑制基因B的表达。

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（3）________________________。

（4）结果

①A组切段在5ppm和10ppm的IAA溶液中呈现凸形弯曲，如图二所示，这表明该浓度IAA对豌豆幼苗上部表皮细胞伸长的促进作用_____（大于、等于、小于）上部薄壁细胞，由此得出结论_______________________。

②不同浓度的IAA溶液中，A切段弯曲的情况和程度又有所不同，说明生长素的作用与________有密切关系。

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