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(2007海南生物,19)已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作。其简要的操作流程如图:

(1)实验步骤①所代表的反应过程是________。

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和________酶,后者的作用是将限制性内切酶切割的________和________连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S基因在大肠杆菌中不能________,也不能________________。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验,从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(相同、不同),根本原因是________。

答案:
解析:

答案:(1)逆转录 (2)DNA连接 载体 S基因 (3)复制 合成S基因的mRNA (4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清 (5)相同 表达蛋白质所用的基因相同

考题解析:(1)RNA为模板合成DNA的过程,称之为逆转录。

(2)利用同一种限制性内切酶将目的基因和运载体切割出相同的黏性末端,再用DNA连接酶能够将目的基因(S基因)和运载体进行缝合,合成重组DNA

(3)直接将S基因导入受体细胞,S基因在宿主细胞内不能复制,也不能表达,所以基因工程中一定要用运载体。

(4)一种抗原只能和一种抗体发生特异性的结合,所以用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清(含有抗体)进行特异性反应实验,来进行检测基因工程表达的S蛋白和病毒S蛋白是否相同。

(5)在研制疫苗过程中,④和⑥中所用的目的基因即S基因是相同的,转录的mRNA是相同的,翻译合成的蛋白质也相同。


提示:

命题思路:该题以研制SARS病毒疫苗的过程为素材,考查基因工程的过程。


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