Question

人们发现小型猪的器官可以用来代替人体的器官进行移植，但是小型猪的器官表面的抗原可以起免疫排斥反应，如图为科学家将小型猪器官的表面抗原基因（Anti）进行“反向处理”，从而获得reAnti基因，将其转入猪的成纤维细胞，培育成转基因克隆猪的过程示意图，其根据图回答问题：
（1）过程1中，在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要，PCR扩增时，需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板结合的

 

、四种脱氧核苷酸和

 

．若使reAnti基因和Anti基因在转基因的克隆猪的同一个细胞内表达，应在人工合成的reAnti基因的首段连接上

 

，其作用是能够被RNA聚合酶识别并结合从而启动转录过程．
（2）过程3将重组质粒导入到猪胎成纤维细胞后，要通过

 

技术检测reAnti基因是否已经重组到猪胎成纤维细胞的

 

上，从而使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．
（3）从猪胎中取成纤维细胞，用胰蛋白酶处理，然后分散培养，培养时培养瓶应置于含

 

的混合气体培养箱中进行培养．
（4）器官移植，基因治疗也可涉及EK细胞，该细胞来源于

 

或原始性腺．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,胚胎干细胞的来源及分化

专题：

分析：结合题意分析图解：图中①为目的基因的获取、②为基因表达载体的构建、③为目的基因导入受体细胞、④将卵母细胞中细胞核移除、⑤为构建重组细胞、⑥为早期胚胎培养、⑦为胚胎移植、⑧为转基因克隆猪的出生．

解答： 解：（1）PCR扩增时，需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板结合的引物、四种脱氧核苷酸和Taq 酶/耐高热DNA聚合酶．启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．因此若使reAnti基因和Anti基因在转基因的克隆猪的同一个细胞内表达，应在人工合成的reAnti基因的首段连接上启动子．
（2）图中进行了细胞核移植，因此可以确定目的基因导入到成纤维细胞的细胞核中的染色体上，因此在在检测目的基因是否导入时，应通过DNA分子杂交技术技术检测reAnti基因是否已经重组到猪胎成纤维细胞的染色体上，从而使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．
（3）在动物细胞培养的过程中，用胰蛋白酶处理，然后分散培养，培养时培养瓶应置于含95%的空气和5%的CO₂混合气体的混合气体培养箱中进行培养，其中的二氧化碳可以维持培养液的PH．
（4）胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺．
故答案为：
（1）引物    Taq 酶/耐高热DNA聚合酶    启动子
（2）DNA分子杂交技术     染色体
（3）95%的空气和5%的CO₂混合气体   
（4）早期胚胎

点评：本题难度适中，属于考纲中识记、理解层次的要求，考查了基因工程中的PCR技术、目的基因的检测、动物细胞培养及胚胎干细胞等方面的知识，要求考生能读懂图示流程以及识记相关基础知识．