Question

【题目】为了调查某城市自来水的水质状况，某研究小组测定了自来水水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。涂布平板所用的培养基是__________(填“固体”或“液体”)培养基；该培养基的制备过程是_________________________________。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落。请分析说明原因(写出二个)① ___________________② _______________。

(2)培养基灭菌后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为_________________ 。

(3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，每次划线之前都要灼烧接种环，目的是_______________________的菌种，使下次划线的菌种直接来源于________________ 。

Answer 1

【答案】固体 计算→称量→溶化→调PH→灭菌→倒平板 培养基灭菌不合格 倒平板过程被污染 5.0×108 杀死上次划线后接种环上残留(或杀死接种环上) 上一次划线末端

【解析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）涂布平板所用的培养基是固体培养基，该培养基的制备过程为：计算→称量→溶化→调PH→灭菌→倒平板。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，若空白培养基出现了菌落，其可能原因是：①培养基灭菌不合格；②倒平板过程被污染（或培养皿灭菌不合格）。

（2）根据题意分析，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49，则每升水样（1L=1000mL）中的活菌数=（51+50+49）÷3÷0.1×1000×1000=5.0×108个。

（3）在利用平板划线法分离水样中的细菌时，每次划线之前都要灼烧接种环，目的是杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。

	第一次灼烧	每次划线之前灼烧	划线结束灼烧
目的	避免接种环上可能存在的微生物污染培养基	杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种	杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者