Question

回答下列有关生物工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生

 

，也可能产生平末端．若要用限制酶切割

 

和质粒后使其直接进行连接，则应选择相同的限制酶．
（2）胚胎干细胞的培养和诱导等操作均需在严格的

 

环境条件下操作，且配制的合成培养液通常需要加入

 

等一些天然成分，还要向培养液中通入一定量的氧气和二氧化碳，氧气参与细胞的代谢，二氧化碳可以维持培养基的

 

．
（3）动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是

 

．
（4）从卵巢中吸取的卵母细胞，一般要培养到

 

阶段才能用于实验，实验中要用微型吸管吸出

 

与去核卵母细胞融合．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,动物细胞核移植技术

专题：

分析：（1）酶具有专一性的特点，不同的限制酶识别不同的DNA序列并从不同位点切割．
（2）胚胎干细胞培养与动物细胞培养条件相似：都需要适宜的营养物质、pH及温度，并且必须在无菌条件下进行．
（3）动物细胞全能性受限制，只有细胞核具有全能性，且分化程度越高全能性越低．

解答： 解：（1）构建基因工程表达载体时，由于酶具有专一性的特点，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端或平末端；为了将目的基因和运载体质粒连接，必须用同种限制酶切割，露出相同的末端，才能根据碱基互补配对原则连接．
（2）胚胎干细胞的培养及诱导的培养基，含丰富的有机物及无机盐，微生物也能生长，故必须在严格无菌的条件下操作，培养液中常加入动物血清等天然成分，向培养液中通入二氧化碳的目的是维持培养基的pH．
（3）由于动物体细胞比胚胎干细胞分化程度高，细胞核的全能性低，故动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植．
（4）采集的卵母细胞一般要培养到减数第二次分裂中期，才能具备受精作用的能力，才能用于实验，核移植实验中要用微型吸管吸出供体细胞的细胞核，植入去核的卵母细胞中，与之融合形成重组细胞．
故答案为：
（1）粘性末端  目的基因
（2）无菌  动物血清  PH
（3）动物体细胞比胚胎干细胞分化程度高，全能性低
（4）减数第二次分裂中期   细胞核

点评：本题综合考查了基因工程、动物细胞培养、胚胎工程等知识及技术应用，意在考查学生运用所学知识，解决生物学问题的能力．