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    12．如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素（由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素）的实验流程．所用的pBR322质粒含有限制酶pasⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的黏性末端各不相同，而Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因．请据图回答以下相关问题：

    （1）过程①所用细胞是人垂体细胞，过程②所用的原料和酶分别是（四种）脱氧核苷酸、逆转录（反转录）酶．
    （2）人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增，扩增前需要人工合成2种引物备用，扩增时应在PCR扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶用以催化互补链的合成．
    （3）若人生长激素基因两端具有限制酶pstⅠ识别序列，切割人生长激素基因和pBR322质粒时只用限制酶pstⅠ的目的是确保产生相同的黏性末端，切割时断开的键是磷酸二酯键．
    （4）过程④所用的酶是DNA连接酶；过程⑤应选择对青霉素和四环素敏感型的大肠杆菌作为受体细胞，为提高转化率，首先用Ca2+处理大肠杆菌使其成为感受态细胞．
    （5）若用限制酶PstⅠ切割，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上，待形成12个菌落后，将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上．一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示．将三角瓶内的大肠杆菌接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上能存活的是导入含完整的pBR322质粒或含有Ampr、Tetr的质粒的大肠杆菌．生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取，选取的依据是在丙中能存活，在乙中不能存活．

    分析 1、分析题图：①表示从人垂体组织细胞提取人生长激素mRNA，②表示反转录形成cDNA，③表示获取人的生长激素基因，④表示基因表达载体的构建，⑤表示将基因表达载体导入大肠杆菌．
    2、与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌成功导入了重组质粒，而且目的基因插入质粒后，破坏了青霉素抗性基因，但没有破环四环素抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生长，但不能在含有青霉素的培养基上生长．

    解答 解：（1）过程①表示从人垂体组织细胞提取人生长激素mRNA，故所用的细胞是人垂体细胞，过程②表示反转录形成cDNA，故所用的原料是（四种）脱氧核苷酸，酶是逆转录（反转录）酶．
    （2）采用PCR技术扩增目的基因需要两种引物．PCR扩增时需要热稳定DNA聚合酶的催化．
    （3）若人生长激素基因两端具有限制酶pstⅠ识别序列，切割人生长激素基因和pBR322质粒时只用限制酶pstⅠ的目的是确保产生相同的黏性末端，切割时断开的键是磷酸二酯键．
    （4）过程④表示基因表达载体的构建，所用的酶是DNA连接酶；过程⑤表示将基因表达载体导入大肠杆菌，应选择对青霉素和四环素敏感型的大肠杆菌作为受体细胞．首先用Ca2+处理大肠杆菌使其成为感受态细胞，可以提高转化率．
    （5）在甲中能生长的是具有四环素抗性的细菌，因此含有四环素抗性基因；在乙培养基上也能存活的大肠杆菌还含有青霉素抗性基因，即在乙培养基上能存活的大肠杆菌含有两种抗性基因，因此其导入的是完整的pBR322质粒或含有Ampr、Tetr的质粒；与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌成功导入了重组质粒，而且目的基因插入质粒后，破坏了青霉素抗性基因，使含有目的基因的大肠杆菌不能在含有青霉素的乙培养基上生长，但四环素基因是完好的，即含有目的基因的大肠杆菌能在含有四环素的丙培养基上生长．
    故答案为：
    （1）人垂体细胞          （四种）脱氧核苷酸、逆转录（反转录）酶
    （2）2     热稳定DNA聚合酶
    （3）相同的黏性末端         磷酸二酯键
    （4）DNA连接酶       对青霉素和四环素敏感        Ca2+
    （5）四环素抗性        完整的pBR322质粒或含有Ampr、Tetr的     在丙中能存活，在乙中不能存活

    点评 本题考查了基因工程和胚胎干细胞的相关知识，考生要能够通过菌落培养的情况确定重组质粒中破坏的抗性基因，进而确定使用的限制酶，要求考生具有一定的析图能力和理解判断能力，难度适中．

    练习册系列答案
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    2．下列关于免疫系统的叙述，正确的是（　　）
    A．免疫器官是免疫细胞产生、成熟或贮存的场所
    B．同一人体内T 细胞和B 细胞的遗传物质不同
    C．只有浆细胞才能产生免疫活性物质
    D．记忆细胞受到相同抗原刺激后只进行细胞分化

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    3．某二倍体植物的花色（紫色、蓝色、白色）由三对常染色体上的等位基因（分别由字母A、a、E、e、F、f表示）控制，如图为基因控制相关物质合成的途径．分析回答下列问题：

    （1）研究发现有A基因存在时花色为白色，则基因A对基因E的表达有抑制作用．
    （2）选取纯合的白花与紫花植株进行杂交，F1全为紫花，F2中白花、蓝花、紫花植株的比例为4：3：9，请推断图中有色物质Ⅰ代表蓝色（填“蓝色”或“紫色”）物质，亲本白花植株的基因型是aaeeff，将F2中的紫花植株自交，F3中蓝花植株所占的比例是$\frac{5}{36}$．
    （3）基因型为AAeeff的植株和纯合的蓝花植株杂交，F2植株的表现型与比例为白花：蓝花=13：3．

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    20．正常人的褐眼（A）对蓝眼（a）为显性，一个蓝眼男子和一个其母是蓝眼的褐眼女子结婚．从理论上分析，他们生蓝眼孩子的概率是（　　）
    A．50%B．25%C．75%D．12.5%

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    7．回答下列有关内环境的问题
    下丘脑是神经系统中维持内环境稳态的重要调节中枢．
    （1）下丘脑分泌的某种激素在维持人体水和电解质平衡中其重要作用，该激素的名称是抗利尿激素．
    （2）寒冷情况下，机体散热减少，产热会增加以维持体温恒定．体温调节中枢位于下丘脑．
    （3）由如图可知，对甲细胞的调节，既可通过神经直接进行调节，还可以通过有关激素进行调节，其原因是甲细胞表面存在接受神经递质的受体和接受激素的受体．
    （4）图中A处的信号转换过程为电信号→化学信号．
    （5）当甲状腺激素分泌增多时，甲细胞分泌的激素会减少，这是一种负反馈（负反馈/正反馈）机制．甲细胞可能是下丘脑内分泌细胞或垂体细胞细胞．
    （6）若甲为肝细胞，人体饥饿时图中C端血糖浓度较B端高，可能的原因是胰高血糖素（填激素）增加，它作用于肝细胞促进肝糖原分解，使血糖维持正常水平．此细胞内的甘油三酯以极低密度脂蛋白的形式运至血液．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．调查发现小型湖泊中的绿藻、蓝藻是露斯塔野鲮鱼和罗氏沼虾的食物，罗氏沼虾又是露斯塔野鲮鱼的食物．图1表示不同体长露斯塔野鲮鱼的食性相对值，图2表示绿藻和蓝藻对水体中N元素、P元素吸收量及其体内藻毒素含量．分析回答：

    （1）该湖泊中露斯塔野鲮鱼与罗氏沼虾的种间关系是竞争和捕食．
    （2）若将体长为2.8cm的露斯塔野鲮鱼增重2kg，至少需要藻类30kg．
    （3）调查露斯塔野鲮鱼的种群密度时，若标记个体更易发现而被捕食，则会导致种群密度估算结果偏高（填“偏高”、“偏低”或“不变”）．
    （4）该湖泊受到富含P元素的生活用水的污染，某科研小组提出生态治污的方案：首先培养藻类去除水体中的P元素．选择的藻类是绿藻，理由是绿藻体内的藻毒素含量低．然后投放体长大于4.2cm的露斯塔野鲮鱼控制藻类的数量．选择体长大于4.2cm的野鲮鱼，其原因是植食性比例高，食物链短，能量利用率高．

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    4．如图是自然条件下某种群数量的动态变化模型．请据图回答下列问题：
    （1）种群密度是种群最基本的数量特征，不能（填“能”或“不能”）反映种群数量的变化趋势．
    （2）图中曲线是反映种群数量动态变化的数学模型．图中A点后，种群的增长速率减小（填“增大”、“减小”或“基本不变”）．在自然条件下，种群数量达到K值后常在K值上下波动，这是因为有些影响种群数量变化的因素呈周期性变化．
    （3）提高种群的K值，可采用就地保护的措施，这是对生物多样性最有效的保护．

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    1．二倍体生物细胞正在进行着丝点分裂时，下列有关叙述正确的是（　　）
    A．细胞中一定存在同源染色体
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    D．细胞中染色体数目可能和体细胞相同

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    2．有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中，筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：
    （1）配置培养基
    ①配制含原油 的固 体培养基．
    ②采用高压蒸汽灭菌．高压蒸汽灭菌有利于杀死细菌与芽孢．
    （2）纯化培养
    ①为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法．
    ②为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力强．
    （3）问题讨论
    无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．

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