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【题目】某研究者用抗原(A)分別免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),毎只小鼠免疫5次,毎次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。然后经过小鼠腹腔内增殖或体外培养,就可以获取大的单克隆抗体A。

回答下列问题:

(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则最少需要经过__________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是__________小鼠,理由是__________

(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外,可能还有__________

(3)杂交瘤细胞中有__________个细胞核,染色休数目最多有__________条。

(4)在制备单克隆抗体的过程中,主要经过两次筛选,第一次是诱导融合之后筛选出_________细胞,第二次是筛选出__________细胞。

(5)获取特异性抗体可以向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有____________________,并可以大量制备等优点。

【答案】YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞1200杂交瘤能产生特异性抗体的杂交瘤特异性强灵敏度高

【解析】

根据题意分析,用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价;据图分析可知,随着免疫次数的增加,血清抗体效价逐渐升高;在第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上;在第五次中,Y的效价最大,最适合用于制备B淋巴细胞;B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种:B淋巴细胞自身融合的细胞,骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,具有2个亲本的染色体,故染色体为100条。

(1)根据以上分析已知,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上,小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高,最适用于制备单克隆抗体

(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞和骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞

(3)杂交瘤细胞中有1个细胞核小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)和骨髓瘤细胞(染色体数目60条)融合后,染色体可达100条,在有丝分裂后期染色体数目临时加倍为200条

(4)在制备单克隆抗体的过程中,第一次筛选的目的是从融合细胞获得杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

(5)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,并可以大量制备等优点。

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(1)科技人员从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的mRNA时,提取液中需添加__________,防止RNA的降解。

(2)在构建重组Ti质粒时,除添加目的基因外,为了使目的基因能表达,还应该添加____________________

(3)过程⑤需应用__________技术,其原理是__________。此过程中培养基中加入卡那霉素的目的__________

(4)过程⑥可采取__________的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过__________的方法来确定植株是否具有抗性。

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B. 光照强度高于P时,突变型的暗反应强度高于野生型

C. 光照强度低于P时,限制突变型光合速率的主要环境因素是光照强度

D. 光照强度高于P时,限制突变型光合速率的主要环境因素是CO2浓度

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(2)由图中的数据_________(“能”或“不能”)确定该品种烟草植株生长的最适光照强度。图中,呼吸速率需要在________________条件下测定。

(3)在实验时段内,第______组的植物有机物积累量最大。将第四组的植株(M)置于第一组的条件下,培养较短的时间后,测得其净光合速率小于第一组,对此结果的合理解释是________________________,导致植株光合速率降低,但呼吸速率不变。依据图中叶绿素a在不同光照强度下的变化趋势,可推测,经过较长时间的适应后,M的净光合速率__________(“能”或“不能”)达到第一组的水平。

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