Question

【题目】某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

(NH4)2SO4	NaCI	MgSO4·7H2O	K2HPO4	1%橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4ml	定容至100ml	7.0g

（1）在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供_________。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是_____________。

（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入___________和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是______________。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落________。

（3）菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为_________(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是__________。

（4）研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明____________。

Answer 1

【答案】碳源 液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和发育提供更多的营养和空间 琼脂 脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色 菌体繁殖能力强、脂肪酶活性高(产脂肪酶能力强) 细菌 接种菌液的浓度过高 脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)

【解析】

微生物培养基的成分包括碳源、氮源、水和无机盐，表格中的培养基没有琼脂，为液体培养基，除了无机盐和水以外，(NH4)2SO4为氮源，则橄榄油为碳源。

（1）根据以上分析已知，表格中的橄榄油为产脂肪酶菌提供了碳源。由于液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和发育提供更多的营养和空间，所以富集培养基宜选用液体培养基。

（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时所用的培养基为固体培养基，所以在上述培养基的基础上，还应加入琼脂；脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸呈酸性，能使溴甲酚紫变为黄色，因此在平板上产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈；菌落大，说明菌体繁殖能力强；黄色圈直径大，说明所产脂肪酶的活性高或产脂肪酶能力强。

（3）菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些特征与细菌的菌落特征相符。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。如果接种菌液的浓度过高，则会导致菌落在平板上连成一片。

（4）在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，因脂肪酶能催化脂肪水解，有利于脂肪的吸收，即脂肪酶菌剂能提高饲料转化率（利用率），导致动物的体重明显增加。