Question

2．干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究．如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示．

（1）在利用PCR技术扩增R或r基因的过程中，利用引物可寻找抗旱基因的位置并进行扩增．
（2）若被检植株发生A现象，不发生B、C现象．据此推测检测另一抗旱植物时会发生A或B（填“A”、“B”或“A 或 B”）现象．
（3）获取抗旱基因时需要用到限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子中的某种特定棱苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二醋键断开．
（4）经检测，抗阜基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是基因表达载体上目的基因的首端未加入启动子．
（5）要快速繁殖转基因抗旱烟草植株，目前常用的技术是植物组织培养，该技术的基本过程是：将离体的烟草细胞诱导脱分化形成愈伤组织，然后再分化出根和芽并发育成小植株．该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和单倍体育种．

Answer 1

分析 1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程．细胞分化的实质：基因的选择性表达．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

解答 解：（1）用PCR技术扩增R或r基因时，需要用引物寻找抗旱基因的位置．
（2）A图显示R基因探针形成杂交斑而r基因探针无杂交斑，表示该抗旱植物基因型为RR，同理B图表示Rr，C图表示rr．另一抗旱植物基因型为RR或Rr，因此会发生“A或B”现象．
（3）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（4）经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子．
（5）植物组织培养技术可快速繁殖抗旱烟草植株，该技术包括脱分化和再分化两个基本过程，其中即将离体的烟草细胞诱导脱分化形成愈伤组织，然后再分化出根和芽并发育成小植株．该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和单倍体育种．
故答案为：
（1）引物
（2）A或 B
（3）磷酸二醋键
（4）基因表达载体上目的基因的首端未加入启动子
（5）植物组织培养    愈伤组织    单倍体育种

点评 本题考查细胞分化、基因工程等知识，要求考生识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质；识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．