Question

12．Ⅰ．细菌常被应用于生产生活中，如有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌．
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上．为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围清晰区域的大小．一般情况下，如图中清晰区域越大说明该菌株的降解能力强．
Ⅱ．另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示：

培养液成分	繁殖一代所需的时间（分钟）
	甲	乙	丙
A．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4	43	100	-
B．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、8种氨基酸	28	40	-
C．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、19种氨基酸	25	25	80

注：“-”表示细菌没有生长．
（2）在A培养基中增殖较快的细菌是甲．丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因是B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸．
（3）由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的．如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质是B、D、E（多选题），
A．碳源    B．氮源    C．生长因子    D．无机盐     E．水
Ⅲ．下面是有关某细菌G的四项实验：
实验1：将G接种于一般培养基上，结果出现菌落．
实验2：用一定剂量的紫外线处理G，产生突变种g1．将g1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落．
实验3：用另一剂量的紫外线处理G，得突变种g2，将g2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落．
实验4：将g1和g2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落．
（4）细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长．其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了A，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶．
A．基因突变     B．基因重组     C．染色体畸变     D．不可遗传变异
（5）实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物．在实验2和3 中，它们是作为C加入一般培养基的．
A．碳源     B．氮源        C．生长因子      D．无机盐
（6）实验4中出现菌落的原因可能是细菌g₁能够合成营养物质乙，细菌g₂能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必须的营养要素．

Answer 1

分析 解答本题需掌握：
1．培养基的概念、种类及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质．

（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2．无菌技术
（1）关键：防止外来杂菌的入侵．
（2）具体操作
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒．
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌．
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行．
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触．
3、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．
4、接种方法：平板划线法和稀释涂布法．

解答 解：（1）从实验目的欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌，可以得出该培养基属于选择培养基，培养基的成分应以原油为唯一碳源．细菌可分解原油，分解能力越强，形成的透明圈越大，透明度越高，一般清晰区域越大说明该菌株的降解能力强．
（2）观察题图表格可以看出在A培养基中，能生长的细菌是甲和乙，甲繁殖一代需要的时间短，所以增殖较快．比较B、C培养基的成分可知，C培养基的氨基酸的种类比B培养基多，所以丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因可能是B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸．
（3）如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质中不需要添加碳源和生长因子．
（4）分析资料可知紫外线照射后发生了基因突变，突变后的g1不能合成甲物质，突变后的g2不能合成乙物质．所以细菌g₁和g₂分别接种于一般培养基，均不能生长．其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了基因突变，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶．
（5）实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物．在实验2和3中，它们是作为生长因子加入一般培养基的．
（6）实验4中出现菌落的原因可能是细菌g₁能够合成营养物质乙，g₂能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必须的营养要素．
故答案为：
（1）原油    该菌株的降解能力强
（2）甲     B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸
（3）B、D、E
（4）A
（5）C
（6）细菌g₁能够合成营养物质乙，细菌g₂能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必须的营养要素

点评 本题考查了选择培养基、微生物培养的环境条件和微生物培养的营养条件等知识，主要考查学生分析实验结果获取有效信息，并分析利用有效信息获取结论的能力．