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    目的基因的获取方法通常包括________和________。
    从细胞中分离     通过化学方法人工合成
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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，写出其生产过程：

    (1)构建转入人胰岛素基因的工程菌。

    ①提取目的基因：用胰岛素基因探针从人的胰岛细胞中获取             ，再用      法制备人的胰岛细胞目的基因。

    ②目的基因与运载体结合：从大肠杆菌的细胞中提取       ，并用      酶切割质粒，使其露出               。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的               ，再将目的基因插人质粒切口处，加入适量的               酶，这样就形成了一个               和               的重组DNA。

    ③将目的基因导人受体细胞：将大肠杆菌用          处理，以增大               的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。

    ④目的基因的检测和表达：在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内，并            后，再对该种大肠杆菌扩大培养。

    (2)发酵生产。如图为发酵罐，回答：（括号中填数字,如[1]）

    ①配制适合大肠杆菌的培养基，调整        ，然后对培养基进行             处理并装入发酵罐，将上述大肠杆菌接种于发酵罐发酵

    ②若经检测若发现放料口排出的旧培养基中微生物细胞形态多样，甚至出现畸形，则此时微生物的生长处于     期，加料口[   ]添加新培养基的速度应该适当     ，并从[   ]以适当速度通入     

    ③若该装置阶段发酵的目的是为扩大培养生产酵母菌菌种，则应尽可能延长         期，采取的主要措施为：加料口放料的速度都           ，通人的无菌空气成分中应           ，搅拌的速度适当             

    ④影响发酵过程中温度变化的因素是                

    ⑤发酵过程中pH变化的原因是                     

    ⑥搅拌器搅拌的作用是                          

    (3)发酵完毕后，从培养基中            并             胰岛素，经过一定的加工成为药用胰岛素，经           合格后，可投入使用。

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年福建省长泰县第二中学高二下学期期中考试生物试卷（带解析） 题型：综合题

    科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：

    （1）人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是 　　            。
    （2）表示的是采取            的方法来获取目的基因。
    （3）图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒    细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用          处理，以增大          的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
    （4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了                         ；
    （5）如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是导入            细菌能生长，导入            的细菌不能生长。因为                                                 。

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    科目：高中生物 来源：2010年福建省泉州一中高二下学期期中考试生物卷 题型：综合题

    （8分）胰岛素被用于治疗Ⅰ型糖尿病，过去主要是从动物的内脏中提取，数量有限。20世纪70年代后，开始采用基因工程的方法生产，如图所示，请据图回答：

    （1）指出图中2、4、6、7的名称:
    2_____________，4_____________，6_____________，7_____________。
    （2）一般获取4采用的方法是___________________或_________________________
    （3）如果7是大肠杆菌细胞，一般用___________处理，以增大____________的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年江苏扬州中学高三上期12月月考试卷生物卷（解析版） 题型：综合题

    （7分）重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。

    (1)引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性                。

    (2)在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，必须将引物l、2和引物3、4  置于不同反应系统中，这是因为                                                  。

    (3)引物l、引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生         种双链DNA分子。

    (4)在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过        次复制。

    (5)若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：           、               、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。

     

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    科目：高中生物 来源：2014届福建省高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：

    （1）人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是 　　            。

    （2）表示的是采取            的方法来获取目的基因。

    （3）图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒    细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用          处理，以增大          的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

    （4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了                         ；

    （5）如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是导入            细菌能生长，导入            的细菌不能生长。因为                                                 。

     

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