Question

4．在生物柴油生产的过程中，会用到脂肪酶和油脂两种原料．已知细菌A可以产生油脂，细菌B可以产生脂肪酶，请回答有关问题：
（1）菌体A中的油脂会被苏丹III染成橘黄色．若菌体A产生的油脂易挥发，可选用水蒸气蒸馏法（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的菌体B单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以油脂为碳源的固体（填“固体”或“液体”）培养基进行培养．
（3）若发现菌体B中含有杂菌，则需要对其接种纯化，常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法．
（4）为了保持菌种的纯净，需要进行保藏．对于频繁使用的菌种，采用临时保藏的方法；对于需要长期保存的菌种，采用甘油管藏的方法．

Answer 1

分析 1、植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取等．
（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性．根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏．
（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油．
（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法．
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色．若菌体A产生的油脂易挥发，可选用水蒸气蒸馏法从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的菌体B单菌落，需要使用选择培养基，选择培养基属于固体培养基．
（3）微生物的分离和纯化常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法．
（4）为了保持菌种的纯净，需要进行保藏．对于频繁使用的菌种，采用临时保藏的方法；对于需要长期保存的菌种，采用甘油管藏的方法．
故答案为：
（1）橘黄      水蒸气蒸馏法
（2）固体
（3）稀释涂布平板法    平板划线法
（4）临时保藏     甘油管藏

点评 本题考查了植物有效成分的提取以及微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握脂肪鉴定的原理，识记植不同物芳香油的提取方法，掌握微生物分离与纯化的方法．