Question

【题目】人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，传统方法只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA (rHSA）的两条途径。请据图回答：

（1）获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。 __

（2）为了便于HAS基因导入水稻细胞，方框中的“?”一般选用的生物是___，为了提高II过程的导入成功率，通常用_____处理大肠杆菌。

（3）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能具有活性，所以，选择_____途径（填I或II)获取rHSA更有优势。

（4）为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA，可以用_____方法来进行检验。

A.检验HSA基因是否导入 B.检验细胞中是否产生相应的mRNA

C．抗原、抗体杂交 D.检测是否有标记基因

（5）为证明rHSA具有医用价值，需确认rHSA与_____的生物学功能一致。

Answer 1

【答案】总RNA （或mRNA） 农杆菌 氯化钙（Ca2＋） I C HSA

【解析】

基因工程技术的基本步骤是：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：(1)分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。(2)个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。据此答题。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取mRNA通过反转录法合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。由于DNA两条链是反向平行的，复制时两条子链的延伸也是方向相反，如图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，则另一条引物位于另一条链的相反一端。另一条引物位置及延伸方向如图所示：。

（2）将目的基因导入受体细胞常利用农杆菌转化法，故方框中的“?”一般选用的生物是农杆菌。将目的基因导入大肠杆菌，常用Ca2+处理大肠杆菌，使之成为感受态。

（3）由于大肠杆菌为原核生物，无生物膜系统，而水稻为真核生物，具有生物膜系统，根据题意：人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能具有活性，所以选择I途径（水稻是真核生物，具有生物膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工）获取rHSA更有优势。

（4）由分析可知，可用抗原－抗体杂交技术检测受体细胞中是否表达出rHSA蛋白，故C符合题意，ABD不符合题意。

（5）为证明rHSA具有医用价值，需对基因工程的产物进行鉴定，即确认rHSA与HSA的生物学功能一致。