尿素是一种重要的农业氮肥.但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后.才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶.脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌.并统计每克土壤样品中活菌数目.培养基配方如下:KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g(1)� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

14．尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？不能（能/不能），原因是培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物．
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目（平均菌落数）就能大约推测出样品中活菌数．常用的微生物接种方法还有平板划线法，此接种法在做第二次以及其后的划线操作时总是从上次划线的末端开始划线的原因是将聚集的菌种逐步稀释分散，从而获得由一个细胞繁殖而来的菌落．
（3）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．

分析 1、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长．
2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落．

解答解：（1）由图中培养基的配方可知，该培养基中，能提供氮源的是蛋白胨和尿素，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨为氮源生长，所以不能分离出分解尿素的菌．
（2）微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，由于图涂布平板时，可以确定涂布的体积，因此要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法进行接种；根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的平均菌落数，进而推出出样品中活菌数．平板划线法时，第一次灼烧接种环的目的是杀灭杂菌，在做第二次以及其后的划线操作时总是从上次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散，从而获得由一个细胞繁殖而来的菌落．
（3）实验结束后，为防止培养的微生物污染环境，使用过的培养基应该进行灭菌．
故答案为：
（1）不能　培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物
（2）稀释涂布平板菌落数目（平均菌落数）平板划线法将聚集的菌种逐步稀释分散，从而获得由一个细胞繁殖而来的菌落
（3）灭菌

点评本题旨在考查学生对选择培养基的选择作用、稀释涂布平板法和平板划线法接种微生物、微生物培养的无菌操作等技术的熟练掌握和应用．

练习册系列答案

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（2015秋•陕西校级期末）下列关于酶的叙述中正确的一项是（）

①酶是活细胞产生的；

②酶都有消化功能；

③酶的基本单位是氨基酸或核糖核苷酸；

④酶能够降低化学反应活化能；

⑤酶促反应与外界条件无关；

⑥淀粉酶能促进淀粉水解；

⑦酶只有在生物体内才起催化作用；

⑧产生酶的细胞都有分泌功能；

⑨酶是生物催化剂；

⑩生长激素与呼吸酶可来自于同一个细胞．

A．①③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑥⑦

C．①②④⑥⑨⑩ D．①③④⑥⑨⑩

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6．我国水果生产发展迅速，由于收获的季节性强，易造成积压，腐烂变质，为了解决上述问题且满足不同人群的需求，可以加工制作果汁、果酒、果醋等．在果汁生产中用到果胶酶，某课题研究小组为了探究果胶酶的某些特性，进行了如下实验：
实验方法：请将图1中所示的操作进行排序．acdb

（2）实验结果：对照组与实验组进行了相同时间的实验，结果如图2所示：
①坐标图中自变量是温度，除此之外还可用D表示．
A．酶的浓度 B．苹果泥的量 C．水的加入量 D．pH
②图中的纵坐标还可用果汁的体积表示．
③步骤b中在果胶酶和苹果泥混合前，将两者分装在不同试管中恒温的目的是保证酶和底物处于相同的温度
④实验小组改变了实验条件后重复做实验，得到曲线乙，苹果汁的澄清度最高点对应的横坐标是同一位置的原因是同种酶的最适温度相同．
（3）根据下表实验结果．不能（能、不能）确定40℃就是果胶酶的最适温度．

温度/℃	10	20	30	40	50	60	70	80
果汁量/mL	8	13	15	25	15	12	11	10

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3．近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体．

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（2）当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中的原料是四种脱氧核苷三磷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则．
（3）PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶以外，至少还要三个条件，即：液体环境、适宜的温度和酸碱度．
（4）通过PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用¹⁵N标记的DNA分子放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则¹⁵N标记的脱氧核苷酸链占全部脱氧核苷酸链总数的比例为$\frac{1}{16}$．

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