Question

【题目】真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示从基因文库提取胰岛素基因的过程，回答下列问题：

（1）过程①用到的酶为_______________________，与基因组文库中的基因相比，cDNA文库中获得的目的基因 _____________(填“不含有”或“含有”)启动子。

（2）过程②的目的是__________________。

（3）过程⑤需将纤维素膜上的细菌___________，释放出DNA，再用32P标记的__________作为探针进行杂交。依据杂交结果，应选取培养基上___________(填字母）菌落继续培养，才能获得含有膜岛素基因的受体菌。

（4）与从基因组文库获取目的基因相比，图示方法获得的目的基因在受体菌中更容易表达，原因是______。

Answer 1

【答案】 逆转录酶 不含有 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给后代，同时使目的基因能够表达并发挥作用 裂解 目的基因（或胰岛素基因） a cDNA中不含有内含子，转录出的RNA不需要经过加工，可直接作为合成蛋白质的模板

【解析】试题分析：据图分析，过程①表示逆转录过程，需要逆转录酶的催化；过程②表示基因表达载体的构建；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示将细菌转移到纤维素膜上；过程⑤表示目的基因的检测。

（1）根据以上分析已知，过程①表示逆转录过程，需要逆转录酶的催化；该过程获得cDNA为部分基因文库，由于其中目的基因是mRNA逆转录形成的，不含有启动子。

（2）过程②表示基因表达载体的构建，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给后代，同时使目的基因能够表达并发挥作用。

（3）过程⑤需将纤维素膜上的细菌裂解，释放出DNA，再用32P标记的目的基因作为探针进行杂交。依据杂交结果中杂交带出现的位置可知，应选取培养基上a菌落继续培养，才能获得含有膜岛素基因的受体菌。

（4）图示方法获得的目的基因在受体菌中更容易表达，是因为cDNA中不含有内含子，转录出的RNA不需要经过加工，可直接作为合成蛋白质的模板。