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    20．华蟾素是我国经典抗肿瘤药物．研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌细胞的作用机理，进行了一系列实验．请根据图中信息回答下列问题．
    Ⅰ．肝癌细胞的培养
    （1）培养肝癌细胞时，在培养基中加入适量的血清（血浆）以补充合成培养基中缺乏的物质，为防止培养过程发生污染要加入抗生素．此外，每48h更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害；同时还要提供适宜的温度、PH、氧气和二氧化碳等环境条件．
    Ⅱ．探究华蟾素药效作用机理的实验：
    （2）DNA拓扑异构酶Ⅱ（简称TopoⅡ）为真核生物所必需，在DNA复制、转录等方面发挥重要作用，TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞．华蟾素注射液处理细胞48h后，采用逆转录-聚合酶链式反应技术检测TopoⅡ基因的表达情况，结果如表．
    华蟾素浓度（μg/ml）00.1050.210.42
    TopoⅡ基因表达量++++++++++++
    ①逆转录-聚合酶链反应的主要原理是：提取肝癌细胞中的总RNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，为完成该反应还需要添加引物、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和四种脱氧核苷酸．
    ②由上可知，华蟾素注射液在分子水平上影响肝癌细胞的机理是抑制TopoⅡ基因的转录，最终导致TopoⅡ含量降低．

    分析 1、动物细胞培养的条件：
    （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
    （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
    （3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
    （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）．
    2、逆转录是指在逆转录酶的催化下，以RNA为模板合成DNA的过程．
    3、PCR技术可在体外大量扩增目的基因．

    解答 解：（1）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，补充合成培养基中缺乏的物质．为了防止动物细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素．定期更换培养液的目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害；同时还要提供适宜的温度、PH、氧气和二氧化碳等环境条件．
    （2））①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应．其主要原理是：提取肝癌细胞中的总RNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增．PCR扩增过程需要添加引物、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和四种脱氧核苷酸．
    ②由图表可知，华蟾素浓度越高，TopoⅡ基因表达量越少．TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞．可推知华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是抑制TopoⅡ基因的转录/表达，最终导致TopoⅡ含量降低
    故答案为：
    （1）血清（血浆）      抗生素     防止代谢物积累对细胞自身造成危害     PH
    （2）①逆转录     引物、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和四种脱氧核苷酸
    ②抑制TopoⅡ基因的转录，最终导致TopoⅡ含量降低

    点评 本题考查动物细胞培养、遗传信息的转录和翻译，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件等知识；识记逆转录过程的概念及条件等；识记PCR技术，能结合表格中信息准确答题．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年湖南省常德市高三上学期第一次月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    成熟的植物细胞具有中央大液泡，可与外界溶液构成渗透系统进行渗透吸水或渗透失水．图甲表示渗透装置吸水示意图，图乙表示图甲中液面上升的高度与时间的关系，图丙表示成熟植物细胞在某外界溶液中的一种状态（此时细胞有活性）．请回答下列问题：

    （1）由图甲漏斗液面上升可知，实验初始时c两侧浓度大小是a b．由图乙可知漏斗中溶液吸水速率在 ，最终液面不再上升，当液面不再上升时，c两侧浓度大小是a b．

    （2）图丙中相当于图甲中c结构的是 （填序号），结构②当中充满的液体是 ．此时细胞液的浓度与外界溶液的浓度大小关系是 ．

    A．细胞液＞外界溶液 B．细胞液＜外界溶液 C．细胞液=外界溶液 D．都有可能

    （3）把一个已经发生质壁分离的细胞浸入清水当中，发现细胞液泡体积增大，说明细胞在渗透吸水，细胞能否无限吸水？ ．原因是 ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    11．研究兽药残留物一莱克多巴胺对人体细胞的毒性大小可以采用的检测技术是（　　）
    A．组织培养技术B．细胞融合技术C．动物细胞培养D．基因拼接技术

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．下列各组化合物中全是内环境成分的是（　　）
    A．O2、CO2、血红蛋白、H+、Na+B．呼吸酶、抗体、激素、H2O
    C．K+、葡萄糖、氨基酸、尿素、H2OD．纤维蛋白原、Na+、载体蛋白、尿素

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题：
    （1）基因工程技术中获得目的基因后，利用PCR技术将该基因扩增，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．培育抗病转基因植物时，使用最多的抗病基因是病毒外壳蛋白基因和病毒复制酶基因．
    （2）在胚胎工程中，早期胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段即可移植到代孕母体子宫中，移植后的胚胎能在受体了宫内存活的生理基础是受体对移入子宮的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应．
    （3）与传统方生成的抗体相比，单克隆抗体具有很多优点．在癌症治疗时，把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞位置，将其在原位杀死．单克隆抗体的制备过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术．
    （4）我国西北一些地区年降雨量较少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”．其失败的原因主要是违背了协调与平衡原理．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    5．我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了大米的营养品质．如图为培育转基因水稻的过程示意图，请据图回答：

    （1）上述过程中，铁结合蛋白基因是目的基因，获取该基因后常用PCR技术进行扩增，该技术利用DNA复制的原理．
    （2）构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和Ti质粒．将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用CaCl2处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入农杆菌．
    （3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得成功导入目的基因的受体细胞，该筛选过程是通过在培养基2中加入潮霉素实现的．
    （4）检测转基因水稻的培育是否成功，需要检测转基因水稻种子中铁含量．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．如图是高等动物细胞，图中结构及标注的错误共有几处（　　）
    A．3B．4C．5D．6

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    9．为研究高光强对移栽幼苗光合色素的影响，某同学用乙醇提取叶绿体色素，用石油醚进行纸层析，如图为滤纸层析的结果（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为色素条带）．下列叙述不正确的是（　　）
    A．强光照导致了该植物叶绿素含量降低
    B．类胡萝卜素含量增加有利于该植物抵御强光照
    C．色素Ⅲ、Ⅳ吸收光谱的吸收峰波长不同
    D．画滤液线时，滤液在点样线上应快速多画几次并尽量粗

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    7．如图为同一生物不同分裂时期的细胞示意图，下列说法不正确的是（　　） 
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    B．若发生染色体的交叉互换，等位基因的分离也可发生在图④中
    C．图③中染色体、染色单体、核DNA的数目之比为1：2：2
    D．图②中染色体数目等于正常体细胞中染色体数目的一半

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