Question

【题目】重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)是临床血栓疾病治疗的主要生物药品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多发情，产仔率高等优点，可以作为乳腺生物反应器批量生产药物。下图是利用转基因兔生产重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)的过程，请据图回答。

(1)构建rhPA基因表达载体需要用限制酶______切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用__________________酶切割重组质粒使之线性化。

(2)对母兔注射__________使其超数排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导入家兔受精卵中最有效的导入技术是_____________。

(3)将受精卵置于37 ℃的95%空气和5%CO2的气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经_______________处理。

(4)子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人纤溶酶原激活剂的生物反应器，原因有____________________________________、________________________________________。

Answer 1

【答案】XhoⅠ Sal Ⅰ和NotⅠ 促性腺激素 显微注射技术 同期发情(发情/孕激素) 只有部分子代兔导入了人纤溶酶原激活剂基因 公兔不能表达人纤溶酶原激活剂基因

【解析】

动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。
乳腺生物反应器是最理想的生物反应器，它的优点：（1）药物蛋白只在乳腺内，对动物的生理活动不影响。（2）长期收集也不会对动物造成伤害。（3）产品成本低。（4）无论纯化还是使用都很方便。

（1）据图分析可知，构建rhPA基因表达载体需要用限制酶XhoⅠ切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重组质粒使之线性化。

（2）对母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导人家兔受精卵中最有效的导人技术是显微注射技术。

（3）将受精卵置于37℃的95%空气和5%CO2气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经同期发情（孕激素）处理。

（4）只有部分子代兔导入了人组织纤溶酶原激活剂基因、公兔不能表达人组织纤溶酶原激活剂，故子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人组织纤溶酶原激活剂的生物反应器。