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    4．“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒．人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染．
    请回答下列问题：
    （1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应具有的复制原点．检测P53基因的表达产物，可以采用抗原-抗体杂交技术．
    （2）如果要大量扩增P53基因，一般采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是热稳定DNA聚合酶．与体内DNA复制相比较，PCR反应要在缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制温度条件．
    （3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚的内细胞团，或胎儿的原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．如果想继续培养则是需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）根据题干信息“载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制”可知，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，科学家选择性地放弃了具有复制原点的载体．检测目的基因是否表达产生蛋白质可采用抗原-抗体杂交技术．
    （2）PCR技术是在较高温度下进行的，因此该技术中需使用热稳定DNA聚合酶；PCR扩增目的基因的过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．因此，与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制温度等条件．
    （3）胚胎干细胞来源于早期胚胎（囊胚的内细胞团）或原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．如果想继续培养则是需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养．
    故答案为：
    （1）复制原点        抗原-抗体杂交
    （2）热稳定DNA聚合酶        缓冲溶液      温度
    （3）内细胞团       接触抑制       胰蛋白酶

    点评 本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记PCR技术的原理、条件及过程；识记胚胎干细胞的来源及特点；识记动物细胞培养的过程，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    17．如图，同一株水毛茛，裸露在空气中的叶和浸在水中的叶，表现出了两种不同的形态．这说明（　　）
    A．水上部分与水下部分的基因型是不同的
    B．水上部分与水下部分的表现型是相同的
    C．基因对性状的控制还受到环境因素的影响
    D．环境因素决定并控制着生物性状的表现

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    15．如图表示小肠上皮细胞吸收葡萄糖的过程，小肠上皮细胞膜上的ATPase（ATP水解酶：）能将胞内Na+主动转运进入血液，以维持肠腔内Na+浓度高于胞内的状态，而小肠上皮细胞内的葡萄糖浓度高于血浆和肠腔．据此判断，下列叙述不正确的是（　　）
    A．Na+由肠腔进入小肠上皮细胞不消耗ATP
    B．ATPase能协助小肠上皮细胞排出K+、积累Na+
    C．SGLT1介导的葡萄糖跨膜运输的方式为主动运输
    D．GLUT2介导的葡萄糖进入血浆的方式为协助扩散

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．如图表示光合作用时ATP形成的图解，图中b6f复合体能将叶绿体基质中的质子（H+）转移到类囊体腔内，该过程需要依赖于水光解时产生的电子（e-）进行推动，有关分析错误的是（　　）
    A．图示过程发生在叶绿体的类囊体薄膜上
    B．质子从叶绿体基质转移到腔内的运输方式是协助扩散
    C．光合作用中ATP合成过程会减小类囊体内外的质子浓度差
    D．物质X既具有催化功能又具有运输功能

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    19．研究人员利用植物组织培养技术，通过图一所示的流程进行育种实验，培育出具有耐盐性的植株．

    回答下列问题：
    （1）图一所示的实验流程中，再分化发生在④（填“①”、“②”、“③”或“④”）过程；用γ射线照射愈伤组织的目的是诱发其基因突变（提高突变率）．实验过程应注意无菌操作，对所用的培养基要进行灭菌处理，对外植体进行消毒处理．
    （2）将经γ射线照射和不经照射处理的愈伤组织，分别转移到含不同浓度NaCl的分化培养基中培养，愈伤组织再分化出幼苗的比例如图二所示，据图分析：
    ①本实验的两个自变量分别是NaCI浓度、是否照射v射线．用剂量为l0Gy的γ射线照射愈伤组织后，获得耐盐性幼苗的比例升高（填“升高”、“不变”或“降低”）．
    ②通过本实验不能（填“能”或“不能”）确定在分化培养基中NaCl浓度大于1.0%时，不经γ射线照射愈伤组织不能分化出幼苗．判断的理由是未获取NaCI浓度为1.0%～1.5%的实验数据，因此不能确定．

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    9．细胞代谢能迅速而有条不紊地进行，离不开酶和ATP的作用，下列有关叙述中正确的是（　　）
    A．酶的催化作用具有高效性是因为酶能降低化学反应的活化能
    B．DNA解旋酶和DNA聚合酶作用的部位相同
    C．在ATP中A代表腺苷，P代表磷酸基团，T代表三个高能磷酸键
    D．ATP的合成与分解都离不开酶

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    16．胰腺癌死亡率高达90%，曾夺走了乔布斯的生命．近来发现胰腺癌患者血液中有一种含量较多的特殊物质，一种名为HSATII的非编码RNA（即不编码蛋白质的RNA），这一特殊RNA可以作为胰腺癌的生物标记，用于胰腺癌的早期诊断，下列有关叙述正确的是（　　）
    A．这种特殊的非编码RNA与mRNA彻底水解后，均可得到5种终产物
    B．作为胰腺癌生物标记的RNA，其翻译成的蛋白质中一般含20种氨基酸
    C．mRNA、tRNA、rRNA都是由DNA转录而来的
    D．核膜上的核孔可以让蛋白质和此种特殊的RNA自由进出

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    13．人体的T淋巴细胞分为两类：CD4+T细胞和CD8+T细胞．CD4+T细胞能促进B淋巴细胞的增殖与分化；成熟的CD8+T细胞受抗原刺激活化，活化的CD8+T细胞可以使靶细胞裂解死亡，同时CD8+T细胞自身也会因此而凋亡．艾滋病病毒（HIV）主要攻击人体的CD4+T细胞，在该细胞中增殖，CD4+T细胞数量不足的情况下，CD8+T细胞不能完全发育成熟．
    （1）CD8+T细胞抑制HIV的过程属于特异性免疫中的细胞免疫．
    （2）在HIV感染者体内，当抗原数量下降时，活化的CD8+T细胞的数量会下降．
    （3）虽然HIV主要攻击人体的CD4+T细胞，但HIV最终会使人体的免疫能力几乎完全丧失，原因是由于CD4+T细胞数量下降，成熟的T细胞数量减少，导致细胞免疫减弱；同时，CD4+T细胞数量下降，影响B细胞的增殖与分化，使体液免疫能力减弱，综上，HIV最终导致人体的免疫调节能力几乎完全丧失．
    （4）HTV的遗传物质还能不断地变异（基因突变），导致HIV能逃脱人体免疫系统对它的识别，使得免疫系统对HIV的控制变得更困难．

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    12．去年入冬以来，由于受气候等因素影响，江西省H7N9疫情呈高发散发态势，2月份更是出现多地暂时关停活禽交易市场，下列关于病毒的叙述正确的是（　　）
    A．可用富含营养物质的培养基培养H7N9，感染H7N9后用干扰素治疗
    B．分析所含核酸碱基种类可确定H7N9遗传物质的类型，其遗传物质彻底水解可得到6种物质
    C．H7N9结构简单，所以病毒是生命系统结构层次中最基本的单位，但不含细胞器
    D．H7N9和大肠杆菌的结构不同，入侵机体时只有特异性免疫发挥功能

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