Question

白细胞介素是一类淋巴因子，有助于流感的治疗．研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的人白细胞介素．
（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由细胞

 

分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖、分化，形成

 

细胞．
（2）通过PCR扩增获取目的基因：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37℃培养48h，提取细胞总RNA，生成

 

．根据已知目的基因的核苷酸序列，人工合成，将以上物质连同

 

，置于PCR仪中，即可获得白细胞介素基因．
（3）重组载体的构建（如图）：酶EcoRⅠ与EcoR52处理载体和目的基因后，用

 

处理，形成重组载体．该载体与细胞膜载体的化学本质分别是

 

和

 

．
（4）如果你利用动物细胞培养实验，来验证基因工程纯化的产物是否符合要求，你的实验目的是

 

．

Answer 1

考点：人体免疫系统在维持稳态中的作用,基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程

专题：

分析：分析题图：图示表示基因表达载体的构建过程，载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点，所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体．

解答： 解：（1）白细胞介素是一种淋巴因子，在体液免疫过程中，是由T细胞分泌的；B细胞能增殖、分化形成浆细胞和记忆细胞．
（2）以RNA为模板合成cDNA称为逆转录（反转录），该过程需要模板（RNA）、酶（逆转录酶和DNA聚合酶）、原料（脱氧核苷酸）和能量．采用PCR技术扩增获取目的基因时需要模板（cDNA）、酶（热稳定DNA聚合酶）、原料（脱氧核苷酸）、引物．因此，根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是：模板cDNA、耐高温（热稳定）DNA聚合酶（Taq酶）、引物．
（3）构建基因表达载体时，需先用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，再用DNA连接酶处理，形成重组载体．该载体的化学本质是DNA，而细胞膜上载体的化学本质是蛋白质．
（4）利用动物细胞培养实验，来验证基因工程纯化的产物白细胞介素是否符合要求，故实验目的是验证纯化产物可以促进淋巴细胞的增殖．
故答案为：
（1）T    浆细胞和记忆
（2）cDNA   引物耐高温的DNA聚合酶和四种dNTP
（3）DNA连接酶     DNA     蛋白质
（4）验证纯化产物可以促进淋巴细胞的增殖

点评：本题结合图解，综合考查免疫、基因工程、PCR技术、微生物的培养和分离等知识，要求考生识记人体免疫细胞的组成及特异性免疫过程；识记基因工程的工具及操作步骤；掌握纯合微生物的方法，能运用所学的知识答题．