Question

【题目】科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系。如图是培育过程简图。

回答下列问题：

(1)阶段Ⅰ的核心步骤是________________，在构建重组质粒b的过程中，一般需用限制酶切割________个磷酸二酯键。

(2)为保证耐盐基因的正常转录，重组质粒b上耐盐基因的两端应含有______________。

(3)阶段Ⅱ的核心过程是________和________，人工配制的培养基中除了必要的营养物质和琼脂外，还必须添加________。

(4)现有两个二倍体水稻品种，其基因型分别为yyRr、Yyrr。科学家进行如下实验：将上述两种基因型水稻产生的花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再把这些融合细胞进行组织培养，培育出水稻植株。该过程中，一般用________作为化学诱导剂来诱导花粉原生质体融合。若原生质体之间只考虑两两融合，培育的后代有________种基因型。

Answer 1

【答案】 基因表达载体的构建 6 启动子、终止子 脱分化 再分化 植物激素 聚乙二醇 6

【解析】【试题分析】

本题考查了基因工程、植物组织培养进和植物细胞杂交的有关知识。

1、图示过程表示转基因水稻的培育过程。阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株。

2、植物体细胞杂交一般用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导花粉原生质体融合。基因型为yyRr的植株可形成yR、yr两种基因型的花粉；Yyrr形成Yr、yr两种基因型的花粉，若原生质体之间只考虑两两融合，同种原生质体融合形成的基因型分别是yyRR、yyrr、YYrr三种；异种原生质体融合形成的基因型为yyRr、YyRr、Yyrr三种（可用数学中的组合公式计算），则培育的后代有6种基因型。可据此答题。

（1）阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，其核心步骤是基因表达载体的构建；在构建重组质粒b的过程中，一般需用同种限制酶切割目的基因的两侧和质粒，共切割6个磷酸二酯键。

（2）启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度；终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。因此，为保证耐盐基因的正常转录，重组质粒b上耐盐基因的两端应含有启动子、终止子。

（3）阶段Ⅱ是植物组织培养阶段，其核心过程是脱分化和再分化；人工配制的培养基中除了必要的营养物质和琼脂外，还必须添加激素。

（4）将基因型分别为yyRr、Yyrr的水稻产生的花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再把这些融合细胞进行组织培养，培育出水稻植株。该过程中，一般用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导花粉原生质体融合；基因型为yyRr的个体产生yR和yr两种基因型的花粉，基因型为Yyrr的个体产生Yr和yr两种基因型的花粉，若原生质体之间只考虑两两融合，即基因型为yR、yr和Yr的三种原生质体两两融合，则培育的后代基因型有＋3＝6种。