Question

Ⅰ．根据微生物发酵技术的原理和要求回答下列问题：
（1）在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在

 

条件下进行．
（2）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是

 

．
（3）若从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌，最简便的方案是在

 

条件下 选择培养．
Ⅱ．根据有关酶和固定化细胞知识回答问题：
（4）制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是

 

，使用方法是

 

（填出号码）．

（5）分离纯化特定的酶，常使用的方法是凝胶色谱法和电泳法．凝胶色谱法是根据

 

分离蛋白质的有效方法，使用凝胶色谱法分离酶时，最先分离出来的是分子量

 

（大或小）的酶分子．使用电泳法分酶，影响酶电泳速度的因素有

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用,制备和应用固相化酶,酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

专题：

分析：1、制备固定化酵母的步骤为酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母菌细胞，其中活化是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；
2、凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试．

解答： 解：（1）微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故整个过程中要严格进行无菌操作．
（2）酵母菌无氧呼吸产生酒精，制作葡萄酒时，酵母菌来自于附着在葡萄皮上的野生型酵母菌．
（3）酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉这四种微生物中，只有酵母菌是兼性厌氧性生物（既能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸），故要分离到较纯的酵母菌，可直接提供无氧环境进行分离．
（4）制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是海藻酸钠，使用方法如图③．
（5）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的由于不能进入凝胶通道而移动速度快，最先分离出来，使用电泳法分酶，影响酶电泳速度的因素有带电多少、带电性质、电压的大小、分子的大小和形状等．
故答案为：（1）无菌
（2）附着在葡萄皮上的野生型酵母菌        
（3）无氧
（4）海藻酸钠   ③
（5）相对分子质量的大小   大  带电多少、带电性质、电压的大小、分子的大小和形状等

点评：本题主要考查选修一的相关实验，知识点较单一，属于考纲中识记水平，考生需将选修教材的内容熟记于心，才能自如作答．