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    20．查耳酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶．图中是将CHS基因导入苦荞，培育高产黄酮类化合物苦荞的过程．请回答：

    （1）构建含CHS基因的重组织粒时，应选用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ，对质粒和DNA片段进行切割．
    （2）若现有两端为平末端的CHS基因，需在其两末端连接上-GAATC-、-CTTAG-（填碱基序列），再用DNA连接酶将它与EooR I（识别序列和切割位点是-G AATC-）切割过的质粒连接得到重组织粒．
    （3）欲利用含卡那霉素（抑制普通苦荞愈伤组织生长）的培养基筛选已导入CHS基因的苦荞细胞，应在构建重组织质粒是接入卡那霉素基因作为标记基因，图中所示的基因导入苦荞细胞的方法为农杆菌转化法．
    （4）图中②过程为脱分化，它利用培养基需含有一定的营养物质和植物激素，时伤愈组织在③（填图中标号阶段分化成胚状体或丛芽）
    （5）判断转基因苦荞培育是否成功，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量，也可测定细胞中CHS的含量，苦荞体细胞能培养成完整植株的根本原因是植物细胞具有全能性．

    分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，需要限制酶和DNA连接酶．
    2、植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个重要过程，而决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要/；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性．

    解答 解：（1）过程①是基因表达载体的构建，质粒和目的基因上都含有PstⅠ、SmaⅠ和EcoRⅠ的作用位点，但是SmaⅠ在目的基因内部，因此需要用PstⅠ和EcoRⅠ将DNA片段和质粒进行切割．
    （2）由题意知，EooR I识别序列和切割位点是-G AATC-，如果CHS基因的末端是平末端，需在其两末端连接上-GAATC、-CTTAG-再用DNA连接酶将它与EooR I切割过的质粒连接得到重组织粒．
    （3）利用含卡那霉素（抑制普通苦荞愈伤组织生长）的培养基筛选已导入CHS基因的苦荞细胞，应在构建重组织质粒是接入卡那霉素基因作为标记基因；图中所示的基因导入苦荞细胞的方法为农杆菌转化法．
    （4）图中②过程是脱分化形成愈伤组织的过程；③是再分化过程；植物组织培养利用的培养基需含有一定的营养物质和植物激素；愈伤组织经过再分化形成胚状体或从芽．
    （5）断转基因苦荞培育是否成功，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物的含量或细胞中CHS的含量；苦荞体细胞能培养成植株的根本原因是植物细胞的全能性即细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因．
    故答案为：
    （1）PstⅠ和EcoRⅠ质粒和DNA片段
    （2）-GAATC-、-CTTAG-DNA连接
    （3）卡那霉素基因  农杆菌转化法
    （4）脱分化   植物激素   ③
    （5）黄酮类化合物   植物细胞具有全能性

    点评 本题综合考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络的能力，并应用相关知识解决实际问题的能力．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年甘肃省高二下学期第二次月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    细胞结构
     

    a
     

    b
     

    c
     

    d
     

    e
     

    A
     

    －
     

    －
     

    －
     

    －
     

    －
     

    B
     

    ＋
     

    ＋
     

    ＋
     

    －
     

    ＋
     

    C
     

    ＋
     

    ＋
     

    －
     

    ＋
     

    ＋
     

    （1）A、B、C分别是菠菜叶、大肠杆菌和小鼠肝脏的一种，则A、B、C分别是 、 、 。

    （2）a～e依次是 、 、 、 、 。

    （3）若将A、B、C的细胞置于清水中，不会胀破的是（填字母） ，因为有 ，其主要成分是 和 。

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    12．一个染色体组应当是（　　）
    A．配子中的全部染色体B．体细胞中染色体数目的一半
    C．来自父方的全部染色体D．二倍体生物的配子中的全部染色体

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．下列有关实验的叙述，正确的是（　　）
    A．向苹果组织液中滴加斐林试剂后出现砖红色的沉淀
    B．用蛋白酶充分水解胰岛素后滴加双缩腺试剂呈现紫色
    C．用甲基绿和呲罗红分别对细胞进行染色可观察细胞中DNA和RNA的分布
    D．用口腔上皮细胞观察线粒体，染色钱需用酒精灯将载片烘干

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    15．将图示细胞置于封闭容器中培养，在不同光照强度下，细胞内外的CO2和O2浓度在短时间内发生了变化．光芒补点是指光合速率与呼吸速率相等时的光照强度．下列叙述错误的是（　　）
    A．黑暗条件下，①、④增大
    B．光照强度低于光补偿点时，①增大、③减小
    C．光照强度等于光补偿点时，②、③保持不变
    D．光照强度大于光补偿点时，②减小，④增大

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    5．假如蛋白酶1作用于苯丙氨酸（C9H11NO2）两侧的肽键，蛋白酶2作用于赖氨酸（C6H14N2O2）氨基端的肽键，某四十九肽经酶1和酶2作用后的情况见图，下列叙述正确的是（　　）
    A．短肽D、E比四十九肽的氧原子、N原子数均少2个
    B．短肽D、E与四十九肽的氧原子数相同，N原子数减少4个
    C．短肽A、B、C比四十九肽的氧原子数少1个，N原子数减少3个
    D．短肽A、B、C与四十九肽的氧原子数相同，N原子数减少2个

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．下列物质中同时含有磷和氮元素的是（　　）
    A．丙氨酸B．丙酮酸C．核苷酸D．脂肪酸

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    9．下列有关DNA和mRNA的描述中正确的是（　　）
    A．所有病毒的遗传物质都是DNA
    B．mRNA易被水解，DNA则较稳定
    C．细菌的mRNA与其DNA一样稳定
    D．DNA可以配对形成双链结构，而mRNA则不能

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    9．新技术的建立和应用对生物学发展至关重要，下列技术与应用匹配不正确的是（　　）
    A．PCR技术--扩增DNA
    B．细胞融合技术--制备单克隆抗体
    C．动物细胞核移植技术--克隆动物
    D．胚胎分割技术--得到性别不同的个体

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