Question

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
①进行转基因操作前，需用

 

酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的

 

和

 

之间．
③采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、

 

和

 

；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用是

 

．
④利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以

 

增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术．基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点．
2、PCR是聚合酶链式反应的缩写．PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术．通过这一技术，可以获取大量的目的基因．PCR扩增反应需要两种引物、模板DNA、原料（4种脱氧核苷酸）、酶（耐高温的DNA聚合酶）．

解答： 解：①进行转基因操作前，需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．
③PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（对干扰素基因特异性的）DNA引物；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用是引物结合到互补DNA链上．
④利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
故答案为：
①胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
②启动子                  终止子
③TaqDNA聚合酶      （对干扰素基因特异性的）DNA引物     引物结合到互补DNA链上  
④增大细胞贴壁生长的附着面积

点评：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断能力．基因工程是考查的重点知识，与细胞工程、胚胎工程等现代生物技术都有一定联系．复习时可以建立知识框架，帮助记忆和理解．