Question

9．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图，请分析回答有关问题：

（1）正确的操作顺序是C→B→E→D→A（用字母和箭头表示）．
（2）如图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是加速细胞的破裂和降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出．
（3）如图A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用，该步骤的目的是提取含杂质较少（或较纯净）的DNA．
（4）为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加二苯胺试剂后沸水浴，如果出现蓝色则证明该丝状物的主要成分为DNA．

Answer 1

分析 DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色．

解答 解：（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水，破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A．
（2）C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂，E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低，析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用，以便除去溶于酒精的杂质，提取含杂质较少（或较纯净）的DNA．
（4）DNA鉴定用二苯胺水浴加热，呈蓝色．
故答案为：
（1）C→B→E→D→A
（2）加速细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出
（3）充分预冷 提取含杂质较少（或较纯净）的DNA
（4）二苯胺 蓝色

点评 本题考查了DNA的粗提取与鉴定的相关知识，包括实验的原理、操作步骤等，意在考查考生的识记能力和实验操作能力，难度适中．考生要识记材料选择的原则、实验原理，注意DNA虽能溶于氯化钠溶液，但是在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低．