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    18．科研人员利用现代生物技术获得转基因奶牛，并利用乳腺生物反应器获得血清白蛋白．
    （1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．血清白蛋白基因结构比较复杂，获取的方法包括从基因文库中获取和PCR技术扩增，若目的基因想在受体细胞中顺利表达，需要在基因上游加入特定的乳腺蛋白基因的启动子，同时在基因下游加入终止子．
    （2）目的基因导入奶牛受精卵中使用的方法是显微注射技术，然后利用受精卵进行胚胎的早期培养，形成囊胚或桑葚胚，然后进行胚胎移植．
    （3）为了获得足够数量的受精卵，可对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，随后利用获能处理的精子进行体外受精，精子的获能方法有培养法和化学诱导法（化学法）．
    （4）若检测转基因胚胎是否成功，需要对早期胚胎进行胚胎分割，然后用DNA分子杂交技术技术检测目的基因是否成功导入．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．血清白蛋白基因结构比较复杂，获取的方法包括从基因文库中获取和PCR技术扩增．根据题干信息，“利用乳腺生物反应器获得血清白蛋白”，因此若目的基因在乳腺细胞中顺利表达，需要在基因上游加入乳腺蛋白基因的启动子，同时在基因下游加入终止子．
    （2）目的基因导入奶牛受精卵中一般采用显微注射技术，然后利用受精卵进行胚胎的早期培养，形成囊胚或桑葚胚，然后进行胚胎移植．
    （3）为了获得足够数量的受精卵，可对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，随后利用获能处理的精子进行体外受精，精子的获能方法有培养法和化学诱导法（化学法）．
    （4）若检测转基因胚胎是否成功，需要对早期胚胎进行胚胎分割，然后用DNA分子杂交技术技术检测目的基因是否成功导入．
    故答案为：
    （1）基因表达载体的构建    PCR技术扩增    乳腺蛋白基因的启动子
    （2）显微注射技术    囊胚或桑葚胚
    （3）促性腺激素   化学诱导法（化学法）
    （4）胚胎分割   DNA分子杂交技术

    点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，识记胚胎移植技术的操作过程，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年广东省梅州市高二上第一次月考理科生物试卷（解析版） 题型：选择题

    精子和卵细胞经过受精作用形成受精卵，在受精卵中（ ）

    A．细胞核的遗传物质完全来自卵细胞

    B．细胞质中的遗传物质几乎完全来自卵细胞

    C．细胞核和细胞质中的遗传物质都平均来自精子和卵细胞

    D．细胞中营养由精子和卵细胞各提供一半

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    9．下列关于噬菌体侵染细菌实验的相关叙述中错误的是（　　）
    A．采用搅拌和离心等手段是为了使DNA和蛋白质分离
    B．用32P进行试验时，离心管的上清液中也能测到放射性的原因可能是实验时间过长
    C．侵染过程的“合成”阶段，噬菌体DNA作为模板，而原料、ATP、酶、场所等条件均由细菌提供
    D．若用32P对噬菌体双链DNA标记，再转入培养有细菌的普通培养基中让其连续复制n次，则含32P的DNA应占子代DNA总数的$\frac{1}{{2}^{n-1}}$

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    6．科学家将绿色荧光蛋白（GFP）基因转入小鼠胚胎干细胞（ES）内，GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如图所示．请回答：

    （1）在步骤①中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入启动子，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP．
    （2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的内细胞团中分离得到．对其进行的初次培养称为原代培养，在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．
    （3）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．
    （4）该小鼠诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：基因工程技术、动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植．（至少答出3项）

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    13．结合所学知识回答下列有关酵母菌的问题：
    （1）2016年诺贝尔生理学或医学奖获得者大隅良典观察到酵母细胞自噬过程，此过程中囊泡需要与细胞内的“消化车间”--溶酶体结合，其结合过程所依赖的原理是生物膜具有流动性．
    （2）如图是探究酵母菌呼吸作用类型的装置（底物为葡萄糖）．如果装置一红色液滴向左移动，装置二红色液滴向右移动，则说明酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸．如果用两套相同的装置一在不同的环境下同时进行实验，红色液滴的移动距离不同，则影响因素最有可能为温度．如果想要验证实验过程中有酒精产生，可取培养酵母菌的培养液向其中滴加酸性重铬酸钾，颜色变化为由橙色变为灰绿色．

    （3）探究培养液中酵母菌种群数量的变化实验中，从试管中吸出培养液进行计数之前，应进行试管震荡操作．采用抽样检测法进行计数，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，在显微镜下进行计数．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．医学研究发现，番茄红素具有一定的抗癌效果，其合成、转化途径如图一所示．由于普通番茄合成的番茄红素易发生转化，科学家设计了一种重组DNA（质粒三）能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞可以识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解，提高了果实中番茄红素的含量（图二）．请分析回答下列问题：

    （1）表达出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的番茄红素环化酶基因，由于“发卡”阻止了其在细胞内的翻译（填“转录”或“翻译”）过程，所以提高了果实中番茄红素的含量．
    （2）为保证第二个目的基因片段反向连接，处理已开环质粒所用的两种限制酶是Ecl和BamHⅠ．
    （3）科学家发现，培育成功的转基因番茄植株对光能的利用能力有所下降，据图一推测可能的原因是胡萝卜素、叶黄素合成受阻，光反应被抑制为解决此问题，可以按照乳腺生物反应器的原理，在此表达出“发卡”的DNA片段前面加入只在果实中发挥作用的启动子．
    （4）去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团．对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成环（自身环化），该DNA分子仍可以和目的基因连接，形成缺少2个磷酸二酯键的重组质粒，随后在细胞中被修复．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    7．图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

    （1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因通过显微注射法（方法）注入羊的受精卵中，发育完全的母羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁．
    （2）图2中的目的基因D需要同时使用MestI和PstI才能获得，而图1所示的质粒无限制酶MestI的酶切位点．所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点．试帮助完成构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用①酶处理质粒；然后用⑤处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸；再用 处理质粒形成限制酶切位点，它可被②识别．（供选答案如下：①EcoRI ②MestI ③PstI ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶）
    （3）假设图1质粒上还有一个PstI的识别序列，现用EcoRI、PstI单独或联合切割同一质粒，得到的DNA长度片段如表．请在图3中画出质粒上EcoRI和PstI的切割位点．（标出酶切位点之间的长度）
    酶DNA片段长度（kb：碱基对）
    EcoRI14kb
    PstI2.5kb、11.5kb
    EcoRI+PstI2.5kb、5.5kb、6.0kb

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．下列关于植物激素的相关叙述，正确的是（　　）
    A．生长素的极性运输同时受内部因素与外部因素的制约
    B．同一浓度的生长素对同一植物的不同器官的作用效果相同
    C．喷施赤霉素能明显促进矮生豌豆的生长，原因是赤霉素能促进细胞分裂
    D．乙烯在植物的各个部位均可以合成，其作用是促进果实成熟

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    2．细胞自噬是真核生物细胞内普遍存在的一种自稳机制，它通过溶酶体途径对细胞内受损的蛋白质、细胞器或入侵的病原体等进行降解并回收利用，其局部过程如图：

    （1）衰老线粒体的功能逐渐退化，会直接影响细胞的有氧呼吸（能量供应）．
    （2）自噬溶酶体内的物质被水解后，其产物的去向是排出细胞或在细胞内被利用．由此推测，当环境中营养物质缺乏时，细胞的自噬作用会增强（填“增强”、“减弱”或“不变）．
    （3）神经退行性疾病是一类由于突变蛋白质在神经细胞中堆积而引起的神经系统失调症．研究发现，提髙细胞的自噬能力能治疗该类疾病，这是因为细胞自噬能清除细胞内突变的蛋白质．
    （4）若该细胞为吞噬细胞，在行使免疫功能降解病原体时分解产生的物质a 进入细胞核中回收利用，则a 物质最可能是核糖核苷酸．

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