Question

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员利用以下两种方法获得了能高效降解化合物A的细菌。

Ⅰ 方法一：研究人员利用有机化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是__________________。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_________________。

(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是________________________。

(4)转为固体培养时，常采用_____________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用显微直接计数法进行计数。若以一个大方格(体积为0.4mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为_________________个/mL。

Ⅱ 方法二：研究人员通过化学方法合成了高效降解化合物A的某种酶的基因，利用PCR扩增后，采用一定方法导入细菌细胞中，经筛选、培养获得高效降解化合物A的细菌。请分析回答：

(1)在利用PCR扩增该酶的基因时，在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸，从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量，请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于______________________。

(2)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为 _____________。

Answer 1