Question

猪的基因和人类的基因存在一定的相似度．据报道经特殊处理的猪皮可在人体上存活3周左右，起保护创面免受感染的作用．为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪．其简要流程图如图所示：

请据图回答：
（1）过程①中用到的工具酶是

 

，将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是

 

．
（2）过程②中，常用

 

酶处理，将皮肤组织块分三次单个成纤维细胞．在培养成纤维细胞时需要满足的条件是通气、适宜的温度、pH、营养物质以及

 

环境．
（3）过程③中，用

 

处理以获取更多的卵（母）细胞，其在体外需培养到

 

期再通过显微操作进行去核处理．
（4）过程中所用的技术是

 

；图中“早期胚胎”移植到代孕母猪子宫内时通常需要培养到

 

期．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：根据图示，可知①是基因表载体的构建、②是动物细胞培养、③是早期胚胎培养．成纤维细胞是动物细胞，常用显微注射法将目的基因导入受体细胞．通过核移植技术形成重组细胞，首先对供体用促性腺激素处理，使其超数排卵；另需要将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才可以去核．在进行胚胎移植时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，此时全能性较高，易于分裂和发育．动物细胞培养基含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，另外需要无菌和无毒的环境．

解答： 解：（1）在构建表达载体时，要用同一种限制酶切割质粒和目的基因，使质粒和目的基因产生相同的末端，再用DNA连接酶连接成重组质粒．受体细胞是动物细胞，可以通过显微注射法将目的基因转化入受体细胞．
（2）动物细胞培养时，取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织），用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞．动物细胞培养需要在无菌、无毒的环境、营养物质充沛、适宜的温度和PH、气体环境等条件．
（3）对供体用促性腺激素处理，使其超数排卵，获取更多的卵母细胞．去核的卵细胞，需要培养到减数第二次分裂中期才可以去核．
（4）在进行胚胎移植时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，此时全能性较高，易于分裂和发育．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶      显微注射法
（2）胰蛋白（或胶原蛋白）     无菌、无毒
（3）促性腺激素      减数第二次分裂中（或MⅡ中期）
（4）（早期）胚胎培养     桑椹胚或囊胚

点评：本题综合考查了细胞工程、胚胎工程和基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．