Question

【题目】土壤中的苯酚(C6H5OH)对环境有极大的污染，科学家为了从土壤中分离出能专一性降解苯酚的微生物，进行了探究实验。下图是部分实验过程，请据图回答。

(1)为了分离纯化目的菌种，①～④步骤的培养基中都加入了一定浓度的苯酚，该物质能为微生物提供碳源，除此之外，培养基中一般都还需要水、___________和___________等营养物质，还要满足微生物生长对___________、特殊营养物质以及氧气的要求。

(2)制备步骤④所需要的固体培养基，操作顺序是：计算→称量→______→_________倒平板。为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落，涂布平板前，需要对培养液进行多次稀释，原因是______________________。

(3)研究人员想通过比较试管甲和乙中微生物的生长情况，证明分离出来的微生物只能以苯酚作为碳源，若甲试管中的液体培养基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙试管中培养基成分与甲相比，区别是___________。研究人员对甲、乙两只试管进行接种时，所选菌种都来自步骤⑤平板上的同一个单菌落，这样做的目的是___________。

(4)当菌落长成后，将试管放入___________℃的冰箱中保藏。

Answer 1

【答案】氮源 无机盐 PH（酸碱度） 溶化 灭菌 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞 用其他碳源替代苯酚 保证甲，乙两支试管中的微生物种类是相同的 4

【解析】

从土壤中分离出能专一性降解苯酚的微生物的实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以苯酚为唯一氨源的培养基上→挑选能生长的→鉴定。

(1)①～④步骤的培养基中苯酚可以为微生物提供碳源，此外培养基中还应该包括水、氮源和无机盐等营养成分，还要满足微生物生长对PH（酸碱度）、特殊营养物质以及氧气的要求。

(2)制备固体培养基的操作顺序为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落，涂布平板前，需要对培养液进行多次稀释，是因为在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞。

(3)甲乙试管是对照实验，如果甲加入的是苯酚，则乙试管加入的是可以替代苯酚的其他碳源。研究人员对甲、乙两只试管进行接种时，所选菌种都来自步骤⑤平板上的同一个单菌落，以保证甲，乙两支试管中的微生物种类是相同的。

（4）保存菌种时，当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。