Question

1990年对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因，而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗．其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养．然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转人培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗患者的免疫功能趋于正常。
(1)为使体外培养细胞的工作成功，必须考虑的培养条件是___________，培养液须含有_____________。
(2)在这基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的_________，此基因工程中的目的基因是_________，目的基因的受体细胞是__________。
(3)将转基因白细胞多次回输患者体内后，免疫能力趋于正常是由于产生___________，产生这种物质的两个基本步骤是__________和__________。
(4)获得腺苷脱氨酶基因的方法可以是________________。

Answer 1

(1)温度、培养液pH、无菌环境       动物血清、氨基酸、葡萄糖、无机盐、水、维生素
(2)运载体     腺苷脱氨酶基因      患者白细胞
(3)腺苷脱氨酶     转录、翻译
(4)①．用“霰弹射击法”获得目的基因，用限制酶切割含有该基因DNA，然后筛选出目的基因；
②．用“逆转录法”获得目的基因，这是在有该基因的信使RNA的条件下经过逆转录酶的作用而得到目的基因；
③．用“化学合成法”获得目的基因，这是在分析腺苷脱氨酶的氨基酸序列后推测基因的核苷酸序列，然后人工合成