利用基因工程技术将突变的IPA1基因转入水稻细胞中从而获得某水稻新品种．(1)培育该转基因水稻新品种的核心是构建重组DNA分子.该过程需要用到的工具酶有限制性核酸内切酶.DNA连接酶．本实验中常用CaCl2处理土壤农杆菌其目的是.增加其细胞壁的通透性.便于重组质粒的导入．(2)在含目的基因的水稻细胞培育成植株过程中可以� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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17．利用基因工程技术将突变的IPA1基因转入水稻细胞中从而获得某水稻新品种．
（1）培育该转基因水稻新品种的核心是构建重组DNA分子，该过程需要用到的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶．
本实验中常用CaCl₂处理土壤农杆菌其目的是，增加其细胞壁的通透性，便于重组质粒的导入．
（2）在含目的基因的水稻细胞培育成植株过程中可以将含有愈伤组织的培养物放在摇床上，通过液体悬浮培养分散成单细胞．在该水稻的培养过程中，相关叙述正确的是D
A．配制只含有适当营养物质的培养基，倒在灭菌试管中凝固成半固体
B．从灭菌的根、茎或叶上切取一些小组织块，进行培养
C．这种单细胞具有细胞质丰富、液泡大、细胞核大的特征
D．水稻体细胞与这种单细胞的全能性表达程度大不相同
（3）利用水稻细胞制备原生质体时，需在0.5〜0.6mol/L的甘露醇溶液中进行处理，该溶液浓度与水稻细胞中的细胞液浓度相当．

分析基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答解：（1）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，该过程首先要用同种限制酶切割目的基因和外源DNA分子，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子．本实验中常用CaCl₂处理土壤农杆菌其目的是，增加其细胞壁的通透性，使之成为感受态细胞，便于重组质粒的导入．
（2）在含目的基因的水稻细胞培育成植株过程中可以将含有愈伤组织的培养物放在摇床上，通过液体悬浮培养分散成单细胞．
A．配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的培养基，A 错误；
B．从消毒的根、茎或叶上切取一些小组织块，B错误；
C．这种单细胞具有细胞质丰富、液泡小、细胞核大的特征，C错误；
D．水稻体细胞比这种单细胞的全能性表达程度要小，D正确．
故选：D．
（3）利用水稻细胞制备原生质体时，需在0.5〜0.6mol/L的甘露醇溶液中进行处理，该溶液浓度与水稻细胞中的细胞液浓度相当，这样可以维持一定的渗透压，保持原生质体的形态．
故答案为：
（1）重组DNA分子限制性核酸内切酶、DNA连接酶（写全得分）细胞壁
（2）液体悬浮 D
（3）细胞液

点评本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．

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