Question

【题目】某公司在防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。回答下列问题：

（1）在进行实验前需要配制培养基。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和________，若还要观察细菌的菌落特征则培养基中通常还需要添加_________________。

（2）为统计洗手前手部细菌数量，应选择的接种方法是____________。通过统计平板上的菌落数一般就能得出接种液中的活菌数，其原理是：_____________________________________。

（3）培养一段时间后可根据菌落的_____________________（至少填两项）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。为了计算洗手前手部单位面积的细菌数量，除图中所示信息外还应知道____________和_____________的准确数据信息。

（4）根据上图所示步骤得出的实验结果可信度低，为了提高实验结果的可信度，请给出一点改进建议__________________________________。

Answer 1

【答案】无机盐 琼脂 稀释涂布平板法 当稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落就来自于一个活菌 大小、形状（隆起程度和颜色） 接种液的稀释度 涂布液的体积 同一稀释度下涂布多个平板，取平板菌落数的平均值或增设空白对照组，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰

【解析】

微生物的研究通常包含微生物的获得、分离纯化、培养以及保存等。单菌落分离法包含划线分离法和涂布分离法，常用于分离获得单菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落（即是由一个单细胞繁殖而成）进行计数的接种方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数法。

（1）无机盐对维持生命活动非常重要，各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。菌落在固体培养基上形成，若还要观察细菌的菌落特征则培养基中通常还需要添加琼脂（凝固剂）。

（2）稀释涂布平板法可以对细菌进行计数，为统计洗手前手部细菌数量，应选择的接种方法是稀释涂布平板法。当稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落就来自于一个活菌，因此通过统计平板上的菌落数一般就能得出接种液中的活菌数。

（3）培养一段时间后可根据菌落的大小、形状（隆起程度和颜色）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。除图中所示信息外还应知道接种液的稀释度和涂布液的体积的准确数据信息，才能知道手部单位面积的细菌数量。

（4）上图所示步骤得出的实验结果可信度低，为了提高实验结果的可信度，同一稀释度下涂布多个平板，取平板菌落数的平均值或增设空白对照组，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。