Question

8．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，该疫苗生产和抗体制备的部分流程如图．

请回答：
（1）①代表的是逆转录过程．为获得A基因表达载体，需用同种限制性核酸内切酶对A基因和运载体进行酶切．除质粒外，噬菌体（或“动植物病毒”）也可作为运载体．将A基因表达载体导入动物细胞的常用方法是显微注射法．
（2）为获得A基因，还可根据A蛋白的氨基酸序列，推测出A蛋白的基因序列，据此可利用化学方法合成A基因．
（3）过程③采用的实验技术是动物细胞融合，获得的X叫杂交瘤细胞．单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强、灵敏度高，并可能大量制备．
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中的A蛋白制备疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测．

Answer 1

分析 结合题意分析图解得，①表示逆转录过程，②表示目的基因的获取，③是细胞融合，得到的是杂交瘤细胞X．
动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，最主要的用途是制备单克隆抗体．单克隆抗体的制备必须用已免疫的B淋巴（效应B淋巴）细胞和骨髓瘤细胞融合，经2次筛选才能选出产生所需单一抗体的杂交瘤细胞，然后要用动物细胞培养技术在体外液体培养基中培养．

解答 解：（1）从图中分析可知，A基因是从病毒提取的RNA，经逆转录产生DNA后获得的．所以过程①代表的是逆转录．为获得A基因表达载体，需用同种限制性核酸内切酶对A基因和运载体进行酶切．除质粒外，噬菌体、动植物病毒也可作为运载体．将A基因表达载体导入动物细胞的常用方法是显微注射法．
（2）为获得A基因，还可根据A蛋白的氨基酸序列，推测出A蛋白的基因序列，据此可利用化学方法合成A基因．
（3）图中将已免疫的效应B细胞和骨髓瘤细胞通过细胞融合，然后经过两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 特异性强、灵敏度高，并可能大量制备．
（4）通过注射疫苗，可能进行传染病免疫预防．所以用A蛋白制作的疫苗，注射到健康人体内，可以进行该传染病的免疫预防．对该传染病疑似患者确诊时，可用抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合来检测．
故答案为：
（1）逆转录     限制性核酸内切     噬菌体（或“动植物病毒”）     显微注射法
（2）氨基酸
（3）动物细胞融合    杂交瘤     特异性强、灵敏度高，并可能大量制备
（4）A蛋白　    抗A蛋白的单克隆抗体

点评 本题难度中等，考查了基因工程、动物细胞工程的相关知识，要求考生了解基因工程的操作步骤，了解动物细胞工程在生产实践中的运用，掌握单克隆抗体的制备过程．