Question

1．葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示．其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为0．lmL．纯化菌种B釆用的是划线接种．请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有核膜．图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为121℃．
（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为稀释涂布平板法，接种乙平板时的操作失误是涂布不均匀．
（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、200、420、190，则样品中菌种A的密度为1900个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是少数菌落可能由两个或多个细胞形成的．
（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有提高温度、通入无菌氧气（空气）．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3、分析题图：图示表示两种微生物的筛选、分离、纯化的过程及果酒和果醋的制作过程，其中候选菌A是酵母菌，候选菌B是醋酸（杆）菌．

解答 解：（2）图中的候选菌A用于酿酒，为酵母菌，属于真核生物，而候选菌B用于发酵酿醋，为醋酸菌，属于原核生物．真核细胞和原核细胞在结构上最主要的区别是真核细胞有核膜．对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法，灭菌时温度为121℃．
（2）分析图乙中培养基培养结果，可以推知采用的纯化方法是稀释涂布平板法；平板乙可能的操作失误是涂布不均匀，倒置菌落分布很不均匀．
（3）除乙外，其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落数分别是180、200、420、190，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，则样品中菌种A的数量为=（180+200+190）÷3÷0.1=1900个/mL．由于少数菌落可能由两个或多个细胞形成的，因此该方法计数的结果常常低于实际值．
（4）果酒发酵是在无氧条件下进行的，其适宜温度是18～25℃，而果醋发酵需要通入氧气，其适宜温度是30～35℃．因此，果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有：提高温度、通入无菌氧气（空气）．
故答案为：
（1）核膜    121℃
（2）稀释涂布平板法   涂布不均匀
（3）1900   少数菌落可能由两个或多个细胞形成的
（4）提高温度、通入无菌氧气（空气）

点评 本题考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和培养，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型；识记接种微生物常用的两种方法；识记无菌技术及菌种保藏的方法，能结合所学的知识准确答题．