Question

5．日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖．GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景．请据图回答相关问题．

（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为目的基因．
（2）过程③将重组质粒导入兔成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是显微注射法．
（3）在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是通过设备检测，发出明亮的绿色荧光细胞即为转基因体细胞．
（4）在④过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等．
（5）以上培育过程中应用到的现代生物技术有转基因技术、核移植技术、动物细胞培养技术等
（6）科学工作者在实验过程中为了保证实验成功，往往一次做多个核移植，为了从乙兔体内一次获得多个卵细胞，往往向乙兔体内注入促性腺激素．
（7）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：②①③④（用数字表示）．
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：该荧光克隆兔的培育采用了多项生物工程技术：首先导入目的基因的甲兔的成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞与乙兔的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母兔子宫内，最后生成荧光克隆兔．该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术．

解答 解：（1）图示过程为将发光水母的绿色荧光蛋白基因进行切割，然后与质粒重组后导入兔的体细胞中，再利用一定的技术培养为荧光克隆兔．可见，该过程中绿色荧光蛋白基因属于目的基因．
（2）过程③将重组质粒导入兔成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是显微注射法．
（3）在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是通过设备检测，发出明亮的绿色荧光细胞即为转基因体细胞．
（4）在④过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等．
（5）上述过程中，导入目的基因的甲兔的成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞与乙兔的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母兔子宫内，最后生成荧光克隆兔．其中应用到的生物技术有转基因技术、核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术等．
（6）促性腺激素能促进超数排卵，故为了从乙兔体内一次获得多个卵细胞，往往需要向乙兔体内注入的是促性腺激素．
（7）蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→相应基因的修饰改造或人工合成→相应的表达．因此，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计→①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列→③蓝色荧光蛋白基因的修饰→④表达出蓝色荧光蛋白．
故答案为：
（1）目的      
（2）显微注射法
（3）发出明亮的绿色荧光细胞即为转基因体细胞
（4）动物血清   
（5）转基因技术、核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术
（6）促性腺       
（7）②①③④

点评 本题结合图解，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物核移植的概念及应用；识记胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确答题．