Question

12．酵母菌种群数量的增长与实验条件密切相关．科研人员试图研究酵母菌接种量和溶氧量对酵母菌种群数量增长的影响． 设计以下实验：
（1）选择生长旺盛的酵母菌为实验材料，用移液器吸取设定的接种量（0.5mL、1.00mL、1.5mL），分别接种入相同体积的同种液体培养基．震荡摇匀，吸取酵母菌悬液观察计数作为初始值．将接种后的锥形瓶置于不同转速的摇床中，28℃恒温培养．
（2）将锥形瓶中的培养液振荡摇匀，用吸管每隔2h取样1次，共取5 次．
（3）取清洁干燥的血球计数板制作装片，先用低倍镜找到计数室，然后换成高倍镜观察计数．
（4）记录测量结果，绘制相关曲线，结果如图分析图中数据，回答下列问题：
（1）结果分析的图示名称为接种量培养液中氧气的浓度．
（2）在实验实施过程中，一般要先采用高压蒸汽灭菌的方法对培养基进行灭菌．若制备装片时，将清洁干燥的血球计数板先在计数室上滴1小滴酵母菌液，静置5min再盖上盖玻片，测量的结果会偏高．
（3）若本实验使用的计数板规格如右图，在计数时一般采用五点取样法法计数．在实验中，最初计数时发现所选取的样方中方格酵母菌总数为零，这时正确的做法是：D
A．将装片清洗干净，重新制备装片进行计数
B．将样液稀释后重新进行制备装片并计数
C．寻找有酵母菌的中方格，然后取其平均值计数
D．直接统计中间整个大方格中的细胞总数
（4）分析实验数据图，可以发现条件为转速250r/min，接种量为1.5mL，培养第六个小时时测得种群密度最高，此时的酵母菌培养液不适合用来制作固定化酵母，原因是种群达到峰值后，由于营养大量消耗、代谢产物增加，酵母菌大量死亡影响固定化酵母的活性．适合制作固定化酵母的酵母菌培养液条件为转速230r/min，接种量为1.5mL，培养第8个小时．

Answer 1

分析 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化实验的原理：
（1）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况．
（2）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目．

解答 解：（1）本实验的目的是要研究酵母菌接种量和溶氧量对酵母菌种群数量增长的影响，因此自变量为酵母菌接种量和溶氧量，因此结果要分析接种量培养液中氧气的浓度．
（2）对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法对其进行灭菌．先将培养液滴加到血球计数板的计数室中再盖上盖玻片计数，由于已加入的液滴的表面张力作用使其未能严密的盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大，从而使计数结果偏高．
（3）血球计数板计数时一般采用五点取样法，以减少使用误差．最初计数时，发现所选取的样方中方格酵母菌总数为零，可以直接统计中间整个大方格中的细胞总数．
（4）由曲线图可知，条件为转速250r/min，接种量为1.5mL，培养第六个小时，测得种群密度最高．制作固定化酵母，要保持酵母菌活性高，但当种群达到峰值后，由于营养大量消耗、代谢产物增加，酵母菌大量死亡，酵母菌的活性降低，因此不合适做固定化酵母细胞．种群数量少适合制作固定化酵母细胞，因此适合制作固定化酵母的酵母菌培养液条件为转速230r/min，接种量为1.5mL，培养第8个小时．
故答案为：
（1）接种量  氧气
（2）高压蒸汽灭菌  偏高    
（3）五点取样法    D
（4）转速250r/min，接种量为1.5mL，培养第六个小时   种群达到峰值后，由于营养大量消耗、代谢产物增加，酵母菌大量死亡影响固定化酵母的活性   转速230r/min，接种量为1.5mL，培养第8个小时

点评 本题结合图解，考查探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验结果及分析等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．