Question

【题目】果酒是用酵母菌发酵形成的酒，含有水果的风味与酒精，是人类最早学会酿造的酒。请完成下列相关问题：

（1）如图是人工培养获得纯净的酵母菌菌种的基本程序。配制培养基时，原料称量溶解之后，进行分装包扎并灭菌，常用的灭菌方法是_________________。平板划线法是常用的接种方法，划线之前要对接种环进行______________________________________灭菌，原因是_________________。

（2）研究发现具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，要添加______和调低_______加琼脂后来灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布于平板。

步骤4：根据________筛选出突变菌。

（3）酿酒过程中，为检测发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是____________。如果检测到活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是_______________。

Answer 1

【答案】 高压蒸汽灭菌法 灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 高浓度蔗糖（或葡萄糖） pH 是否能在选择培养基上生长 pH的大小，pH越小取样时间越靠后 隔绝空气

【解析】由题文描述可知：该题综合考查学生对微生物的实验室培养、以及菌种的分离和果酒的制作等相关知识的识记和理解能力。

(1) 培养基配制的基本流程为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节pH→灭菌→倒平板，其中的“灭菌”常用高压蒸汽灭菌法。采用平板划线法接种微生物时，划线之前要对接种环进行灼烧，其目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。

(2) 为了得到具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，在对野生酵母菌进行诱变后，利用选择培养基进行筛选时，需先制备选择培养基，即在基本培养基的基础上，添加高浓度蔗糖（或葡萄糖）和调低pH加琼脂后来灭菌，制成固体平板，然后将紫外线照射后的菌液稀释涂布于平板上。在该平板上，只有具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌才能生长，因此可以根据是否能在选择培养基上生长来筛选出突变菌。

(3) 在酿酒过程中，发酵罐中酵母菌进行细胞呼吸产生的CO2会导致发酵液的pH减小，而且发酵时间越长，pH减小的幅度越大。可见，判断取样先后顺序的主要依据是pH的大小，pH越小取样时间越靠后。酵母菌进行无氧呼吸时才产生酒精，据此可知：如果检测到活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是隔绝空气。