Question

下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。据图回答：

（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的___________中取出受精卵。图中早期胚胎应保证发育到____________________阶段，才能进行后续过程的操作。
（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是_____________________________。
（3）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是                 。
（4）大肠杆菌细胞内应不含          基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有________种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占___________。
（6）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如乙、丙图所示。据图分析丙培养基中含人生长激素基因的菌落有_____个。

Answer 1

（1）输卵管  桑椹胚或囊胚  （2）基因的选择性表达（或皮肤细胞不能合成生长激素的mRNA）
（3）Pst I酶和EcoR I酶  （4）标记（青霉素抗性基因(Amp^r)和四环素抗性(Tet^r)
（5）6   1/6   （6）2

解析试题分析：（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的输卵管中取出受精卵。图中早期胚胎应保证发育到桑椹胚或囊胚阶段，才能进行后续过程的操作。
（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是基因的选择性表达或皮肤细胞不能合成生长激素的mRNA。
（3）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是Pst I酶和EcoR I酶。
（4）大肠杆菌细胞内应不含青霉素抗性基因(Amp^r)和四环素抗性(Tet^r)基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有6种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占1/6。
（6）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如乙、丙图所示。据图分析丙培养基中含人生长激素基因的菌落有2个。
考点：本题考查胚胎工程、基因工程和微生物培养，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。