Question

【题目】某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
11.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）为保持干燥，培养皿用________________法灭菌；待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________，防止造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是____________________________________________。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为________________。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有________个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为________。

Answer 1

【答案】 干热灭菌 50 培养皿盖上的水珠落入培养基 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，(培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素) 检测培养基平板灭菌是否合格 3.9×107 2 15

【解析】试题分析：根据表格分析，该培养基含有有机碳源、氮源、无机盐、水，且含有琼脂，说明是固体培养基。筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基。分离纤维素分解菌计数时需要用稀释涂布平板法接种。

（1）微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，而玻璃器皿可以使用干热灭菌。倒平板时需要培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰旁进行，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

（2）据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素分解菌。

（3）微生物培养的关键是无菌，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由题意知1ml水样中的菌落数是（42+38+37）÷3÷0.1×100=3.9×104个，则每升水样中的活菌数为3.9×104×103=3.9×107。

（4）据图分析，左图血球计数板中有2个计数室；右图中格的细菌计数原则是内部全部计算，边框遵循计上不计下，计左不计右的原则，所以该中格中有15个酵母菌。