Question

【题目】如图是从酵母菌细胞内获取某植物需要的某种酶基因的流程，请回答下列问题：

（1）图中cDNA文库含有酵母菌的_______基因，①过程提取的DNA需要____________________切割。

（2）为在短时间内大量获得目的基因，可用_____________扩增的方法，该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、______________和_______________。

（3）将目的基因导入某双子叶植物细胞中常用____________________法。

（4）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_____和_____，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质。

Answer 1

【答案】

（1）部分（1分） 限制性核酸内切酶（2分）

（2）PCR技术（2分） 引物（对） （2分） 热稳定性DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶） （2分）

（3）农杆菌转化法（2分）

（4）设计蛋白质的结构（2分） 推测氨基酸序列（2分）

【解析】

（1）基因组文库包括了该种生物所有的基因，而部分基因文库只包含一种生物的部分基因，因此cDNA文库小于基因组文库。从酵母菌细胞中提取DNA时，需用到限制性核酸内切酶。（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，采用该技术能在短时间内获得大量目的基因。该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、引物和热稳定性DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）。

（3）将基因表达载体导入双子叶植物细胞常用农杆菌转化法。（4）蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质的结构和推测氨基酸序列，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列。