Question

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
		1400		800    600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
		1300		800    500
		1200		1000   200
	经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了       原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为    个和    个。

（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化       键的形成。

Answer 1

（1）对照（单一变量）              （2）3    2

（3）（2分）

（4）　磷酸二酯键