Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因，然后在           酶的作用下构建重组载体。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________。
A．启动子　　　　　　　　　 B．tetR        C．复制原点      D．ampR
(3)过程①可采用的操作方法是________。
A．农杆菌转化      B．大肠杆菌转化
C．显微注射        D．细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是________。
(5)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________技术。
A．核酸分子杂交        B．基因序列分析
C．抗原—抗体杂交      D．PCR

Answer 1

（除指定空外每空 1 分，共8分）
（1）BamHI和HindIII （2分）   DNA连接酶        氨苄青霉素
（2）A                    （3）C
（4）胚胎移植             （5）C

解析试题分析：（1）由图可知目的基因和质粒上都有BamHI和HindIII酶切位点，因此应用它们切割，切割后需要将目的基因和运载体用DNA连接酶进行连接，因为该质粒上有抗氨苄青霉素的抗性标记基因，因此应放在含氨苄青霉素的培养基中进行培养以便筛选。
（2）基因的表达主要是转录和翻译，启动子是驱动基因进行转录的，故应是A。
（3）因为是要导入到动物细胞中，故最常用显微注射法，故C正确。农杆菌转化法是将重组载体导入到植物中常用的方法，故A错误。大肠杆菌转化法是导入到微生物细胞常用的方法，故B错误。细胞融合是细胞工程技术。
（4）将早期胚胎移入到代孕牛体内应用胚胎移植。
（5）检测蛋白是否表达，可以用抗原抗体杂交，故C正确。
考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。